Валидированный методом KO кроличий моноклональный антитело против каспазы-9 для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, ELISA - P55211

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация каспазы-9

• Каспаза-9 является членом семейства цистеин-аспарагиновых протеаз (каспаз) и выполняет ключевую роль как инициаторная каспаза во внутреннем (митохондриальном) пути апоптоза. Кодируется геном CASP9 (GeneID: 842), также известна как апоптотическая протеаза Mch-6, APAF-3 и ICE-LAP6.
• После связывания с Apaf-1 каспаза-9 формирует апоптосому и активируется. Затем она расщепляет и активирует нижестоящие эффекторные каспазы, в первую очередь каспазу-3 и каспазу-7, для осуществления апоптоза.
• Каспаза-9 способствует апоптозу, индуцированному повреждением ДНК, зависимым от ABL1/c-Abl способом. Она также протеолитически расщепляет поли(АДФ-рибоза) полимеразу (PARP) и BIRC6. Расщепление BIRC6 происходит после ингибирования связывания BIRC6 с каспазой белком DIABLO/SMAC. Связанные ссылки: PMID:36758105 PMID:36758106
• Альтернативно сплайсированная изоформа (изоформа 2) лишена каталитической активности и действует как доминантно-негативный ингибитор каспазы-9, обеспечивая механизм регуляции.
• Экспрессия в тканях повсеместная, с наибольшим уровнем в сердце (в частности, в миоцитах), умеренной экспрессией в печени, скелетных мышцах и поджелудочной железе и низким уровнем в других тканях.
• Как зимоген, каспаза-9 требует протеолитического расщепления для активации. Её активность дополнительно регулируется фосфорилированием и убиквитинированием. Белок классифицируется как тиоловая протеаза, и его трёхмерная структура определена.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген, использованный для получения этого антитела, покрывает аминокислоты 139–416, включая каталитический домен. Следовательно, антитело может детектировать как полноразмерную проформу (~46 кДа), так и расщепленные активные фрагменты. Рекомендуется включать соответствующие контроли при оценке активации каспазы.
• Для Вестерн-блоттинга в необработанных образцах ожидается основная полоса около 46 кДа; при индукции апоптоза могут появляться дополнительные полосы меньшего размера. Проверяйте специфическую картину в вашей модельной системе.
• Это антитело валидировано методом нокаута (KO), что указывает на надежную специфичность к каспазе-9 в образцах человека, мыши и крысы. Оно подходит для обнаружения эндогенных уровней белка.
• В экспериментах по иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC) каспаза-9 локализуется преимущественно в цитоплазме, но может наблюдаться в ядре при определенных апоптотических условиях. Соответственно оптимизируйте протоколы фиксации и пермеабилизации.
• Для применения в ELISA оценивайте это антитело в составе согласованной пары с другими клонами антител против каспазы-9 для достижения оптимальной чувствительности и специфичности.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и исследовательским институтам единую точку доступа к сырьевым материалам для IVD, техническим услугам и консалтингу — охватывая каждый этап от концепции до клинического применения. Для исследований апоптоза мы поставляем широкий спектр антител, включая этот валидированный клон против каспазы-9, а также рекомбинантные белки, согласованные пары антител и вспомогательные реагенты оптом. Наши возможности по поиску и поставке распространяются на редкие и заказные мишени, гарантируя, что вы сможете эффективно получить все необходимые компоненты.