[Валидировано KD] Моноклональное анти-YTHDC1 антитело для Вестерн-блоттинга (WB), ИГХ (IHC-P), ИП (IP), ИФА (ELISA) - Q96MU7

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: функция и локализация YTHDC1

• Белок 1, содержащий домен YTH (YTHDC1), также известный как YT521-B или фактор сплайсинга YT521, является членом семейства РНК-связывающих белков с доменом YTH, который специфически распознает РНК, модифицированные N6-метиладенозином (m6A). Связанные ссылки: PMID:25242552, PMID:26318451, PMID:26876937

• YTHDC1 функционирует как ключевой регулятор альтернативного сплайсинга, связываясь с пре-мРНК, содержащей m6A, и рекрутируя факторы сплайсинга. Взаимодействие с SRSF3 способствует включению экзонов, в то время как конкуренция с SRSF10 приводит к ингибированию пропуска экзонов. Связанные ссылки: PMID:26876937

• Он также играет роль в ядерном экспорте мРНК, модифицированных m6A, за счет одновременного связывания с SRSF3 и фактором ядерного экспорта NXF1, способствуя транспортировке мРНК из ядра в цитоплазму. Связанные ссылки: PMID:28984244

• YTHDC1 участвует в регуляции инактивации X-хромосомы, распознавая m6A на РНК Xist и способствуя ее активности по транскрипционной репрессии, тем самым внося вклад в сайленсинг одной из X-хромосом у самок млекопитающих. Связанные ссылки: PMID:27602518

• Помимо РНК, YTHDC1 может также связывать одноцепочечную ДНК, содержащую m6A, что указывает на более широкие роли в процессах, опосредованных нуклеиновыми кислотами. Связанные ссылки: PMID:32663306

• На субклеточном уровне YTHDC1 локализуется преимущественно в ядре и обогащен в ядерных спеклах (speckles), которые являются местами хранения и модификации факторов сплайсинга, что согласуется с его ролью в процессинге пре-мРНК.

• Посттрансляционные модификации включают фосфорилирование и убиквитинирование (образование изопептидной связи), которые могут регулировать его активность и стабильность. Предполагаемая молекулярная масса белка составляет 84,7 кДа, при этом наблюдаемая полоса при вестерн-блоттинге составляет около 85 кДа.

• YTHDC1 необходим для развития зародышевой линии; исследования на модельных организмах показывают его потребность для развития сперматогониев у самцов и роста ооцитов у самок, вероятно, благодаря его функциям альтернативного сплайсинга.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-терминальным 71 аминокислотам человеческого YTHDC1. Поскольку эпитоп отображается на область, общую для нескольких вариантов сплайсинга, антитело может обнаруживать несколько изоформ; рекомендуется валидация в соответствующей клеточной линии или ткани.
• Анализ с помощью вестерн-блоттинга с использованием этого антитела, как ожидается, покажет полосу вблизи 85 кДа. Могут быть использованы лизаты клеток человека, мыши или крысы, но точный характер полос должен быть подтвержден в используемых экспериментальных условиях.
• Для иммуногистохимии (IHC-P) ожидается преимущественно ядерный сигнал, часто сконцентрированный в ядерных спеклах. Для каждого типа ткани может потребоваться оптимизация восстановления антигена и разведения антитела.
• Антитело подходит для иммунопреципитации (IP) эндогенного YTHDC1; совместная иммунопреципитация взаимодействующих партнеров, таких как SRSF3, может быть исследована с использованием соответствующих контролей.
• Приложения ELISA могут быть разработаны с использованием этого антитела в качестве реагента для захвата или детекции; для формата «сэндвич» ELISA рекомендуется использование поликлонального детектора или подобранной пары антител.
• Валидация нокдауна (KD) подтверждает, что сигнал снижается при истощении YTHDC1, что подтверждает его специфичность для идентификации мишени в исследованиях по сайленсингу генов.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по сырью для IVD, предлагая валидированные антитела, такие как это кроличье моноклональное антитело YTHDC1, для поддержки исследований модификации m6A, регуляции сплайсинга и эпигенетики. С портфолио, включающим моноклональные и поликлональные антитела, пары антител и вспомогательные реагенты, мы помогаем производителям диагностических средств и лабораториям ускорить разработку анализов от концепции до клиники. Для индивидуальных требований, включая крупносерийное производство и поиск специфических мишеней, наша техническая команда предлагает адаптированные решения для удовлетворения потребностей вашего проекта.