Валидированное KD кроличье моноклональное антитело против TFEB для WB, IHC-P, ELISA, ChIP - P19484

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация TFEB

• TFEB (Транскрипционный фактор EB), также известный как белок 35 класса E с основной спиралью-петлей-спиралью (bHLHe35), принадлежит к подсемейству MiT/TFE транскрипционных факторов bHLH-Zip (основная спираль-петля-спираль-лейциновая застежка), которое включает MITF и TFE3.
• Он функционирует как главный регулятор биогенеза лизосом и аутофагии, связываясь с мотивами CLEAR (координированная экспрессия и регуляция лизосом) (5′-GTCACGTGAC-3′) в промоторах лизосомных и аутофагических генов. Связанные ссылки: PMID:19556463, PMID:22692423
• Активность TFEB жестко контролируется чувствительным к питательным веществам фосфорилированием: в условиях кормления фосфорилирование, опосредованное mTOR по множеству остатков серина, удерживает TFEB в цитозоле; голодание или лизосомный стресс ингибируют mTOR, что приводит к быстрой дефосфорилированию и транслокации в ядро. Связанные ссылки: PMID:21617040, PMID:22343943, PMID:22576015
• В ядре TFEB димеризуется сам с собой или с другими членами семейства MiT/TFE для активации транскрипции генов-мишеней, участвующих в аутофагии, липидном метаболизме, энергетическом гомеостазе и иммунной защите. Связанные ссылки: PMID:1748288, PMID:29146937
• Кроме того, TFEB играет роль в адаптивном иммунитете, регулируя экспрессию CD40L в Т-клетках, и в антибактериальном врожденном иммунитете посредством алкилирования, опосредованного итаконатом, которое способствует его ядерной локализации и биогенезу лизосом. Связанные ссылки: PMID:35662396
• Субклеточная локализация является динамичной: в основном цитоплазматическая при фосфорилировании, она перемещается в ядро при активации; также может ассоциироваться с мембраной лизосом.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 50–173 человеческого TFEB (NP_009093.1). Этот регион находится внутри N-концевого домена транскрипционной активации, который относительно консервативен у человека, мыши и крысы, что подтверждает заявленную перекрестную реактивность. для видов, не указанных в списке, рекомендуется выравнивание последовательностей.
• Для вестерн-блоттинга TFEB может появляться в виде двойной полосы между 44 и 53 kDa из-за дифференциального фосфорилирования или альтернативного сплайсинга; использование свежих ингибиторов фосфатаз в буфере для лизиса может помочь сохранить фосфоро-изоформы. Специфичность антитела была валидирована с использованием нокдауна (KD Validated).
• В иммуногистохимии (IHC-P) условия восстановления антигена должны быть оптимизированы для вашего типа ткани. Ядерное и цитоплазматическое окрашивание могут наблюдаться в зависимости от состояния активации TFEB.
• Для ChIP убедитесь, что условия сшивания и фрагментации оптимизированы для вашего типа клеток; антитело должно эффективно обогащать промоторные области, содержащие последовательности CLEAR или E‑box.
• Выполняйте соответствующие положительные и отрицательные контроли (например, лизаты с нокаутом TFEB, локусы известных генов-мишеней) при настройке анализов.

CamelBio: Ваш комплексный мост для закупок

CamelBio — ваш интегрированный партнер для закупки сырья для IVD, поддерживающий весь рабочий процесс разработки от ранних исследований до клинического применения. Это антитело против TFEB, нацеленное на ключевой узел в биологии аутофагии и лизосом, поддерживается нашим комплексным предложением валидированных пар антител, моноклональных/поликлональных антител, вспомогательных реагентов оптом и индивидуального поиска для нишевых мишеней. Свяжитесь с нами, чтобы узнать, как мы можем ускорить разработку ваших диагностических анализов с помощью надежных высококачественных материалов.