[Проверено KD] Кроличья поликлональная антитело против eIF4E для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИКК, ИП, ELISA - P06730

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация eIF4E

• eIF4E (кодируется геном EIF4E; альтернативные названия EIF4EL1, EIF4F) — это 25 кДа мРНК-кэп-связывающий белок, важнейшая субъединица для распознавания кэпа в комплексе инициации трансляции eIF4F, который обеспечивает кэп-зависимую трансляцию, облегчая рекрутинг 43S пре-инициационного комплекса к 5′-концу мРНК. Связанные ссылки: PMID:11606200 PMID:22578813 PMID:22684010
• Он специфически связывает 7‑метилгуанозиновую (m7G) кэп-структуру мРНК и способствует АТФ‑зависимому расплетению вторичных структур на 5′‑конце, что является критическим шагом для связывания рибосомы и сканирования. Связанные ссылки: PMID:16271312 PMID:22578813
• В ядре eIF4E опосредует экспорт мРНК, формируя комплексы с LRPPRC и XPO1; он облегчает ядерно-цитоплазматический транспорт специфических транскриптов, таких как NOS2/iNOS и MDM2, тем самым влияя на их цитоплазматическую экспрессию. Связанные ссылки: PMID:23471078 PMID:22684010
• В цитоплазматических P-тельцах eIF4E участвует в комплексе, который секвестрирует трансляционно неактивные мРНК, предотвращая их деградацию и обеспечивая хранение или последующую трансляционную реактивацию. Связанные ссылки: PMID:24335285
• Вместе с EIF4G1, eIF4E необходим для TISU (Translation Initiator of Short 5′ UTR)‑зависимой трансляции — механизма без сканирования, который обходит необходимость в сканировании, промотируемом eIF1. Связанные ссылки: PMID:29987188
• eIF4E локализуется в нескольких субклеточных компартментах: цитоплазме (включая P-тельца и стрессовые гранулы) и ядре (ядерные спеклы, ядерные тельца), что отражает его двойные функции в трансляции и экспорте РНК.
• Белок подвергается посттрансляционным модификациям, таким как ацетилирование и фосфорилирование, которые модулируют его аффинность связывания с кэпом и взаимодействие с белками-партнерами.
• Дисрегуляция eIF4E связана с расстройствами аутистического спектра и опухолеобразованием, часто посредством хромосомных перестроек или сверхэкспрессии, которые изменяют клеточные программы трансляции.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген находится в N‑концевой области (а.о. 1‑100), которая не подвергается сильным модификациям; эти антитела могут детектировать как фосфорилированный, так и нефосфорилированный eIF4E, но пользователям следует проверять специфичность в своих собственных системах.
• Для Вестерн-блоттинга ожидайте основную полосу около ~25 кДа; заявленная молекулярная масса eIF4E составляет 25 кДа (теоретическая ~25.1 кДа), и он может проявляться в виде одиночной полосы или дублета в зависимости от статуса фосфорилирования.
• При ИГХ‑П условия демаскировки антигена (например, цитратный буфер pH 6.0) следует оптимизировать; в качестве положительного контроля используйте ткани с высокой экспрессией eIF4E, такие как семенники, пролиферирующие клетки или определенные опухолевые срезы.
• Для иммунопреципитации используйте шарики Protein A или G, подходящие для кроличьих поликлональных антител; сшивание антитела с шариками может улучшить выход низкообильных комплексов.
• При ИФ/ИКК может наблюдаться как цитоплазматическое, так и ядерное окрашивание; включите соответствующие этапы пермеабилизации и блокирования и рассмотрите возможность докрашивания маркерами P-телец или ядра для оценки изменений локализации.

CamelBio: Ваш единый партнер для закупок

CamelBio служит комплексным единым партнером для сырья IVD, предлагая широкий спектр антител против факторов инициации трансляции и мишеней метаболизма мРНК. Наш портфель включает валидированные поликлональные антитела, такие как это анти-eIF4E, а также подобранные моноклональные пары и вспомогательные реагенты, разработанные для поддержки разработки диагностических наборов и исследований в области наук о жизни. Для получения индивидуальных материалов, связанных с eIF4E, или оптовых заказов, пожалуйста, свяжитесь с нашей командой по закупкам, чтобы обсудить ваши конкретные требования.