[Валидация KD] Кроличье моноклональное антитело к ауроре B для ВБ, ИФ/ИКК, ИФА - Q96GD4

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация ауроракиназы B

• Ауроракиназа B (AURKB, также известная как AIK2, AIM1, STK12) — это серин/треонинкиназа, являющаяся каталитической субъединицей хромосомного пассажирного комплекса (CPC), который необходим для точной сегрегации хромосом и цитокинеза (PubMed:11516652, PubMed:12925766, PubMed:14610074). Связанные источники: PMID:11516652 PMID:12925766 PMID:14610074
• Она регулирует ключевые митотические события путем фосфорилирования таких субстратов, как BIRC5/сурвивин, INCENP, гистоны H3S10/H3S28 и CENPA, обеспечивая активацию контрольной точки сборки веретена деления и прикрепление кинетохоров к микротрубочкам (PubMed:11784863, PubMed:11856369, PubMed:11756469). Связанные источники: PMID:11784863 PMID:11856369 PMID:11756469
• Активность AURKB усиливается путем фосфорилирования INCENP через петлю положительной обратной связи с HASPIN в центромерах (PubMed:11516652, PubMed:21658950). Связанные источники: PMID:11516652 PMID:21658950
• Киназа является критическим компонентом контрольной точки цитокинеза, она фосфорилирует CHMP4C для задержки абсциссии и предотвращения образования хромосомных мостов (PubMed:22422861, PubMed:24814515). Связанные источники: PMID:22422861 PMID:24814515
• Во время митоза AURKB динамически локализуется в ядре, центромерах, кинетохорах, микротрубочках веретена деления и среднем тельце, что отражает его множество функций в динамике хромосом и клеточном делении.
• Она сильно экспрессируется в вилочковой железе, селезенке, легких, яичках, толстой кишке, плаценте и фетальной печени, ее экспрессия достигает пика в фазах S и G2/M; она часто гиперэкспрессирована при раке, при этом в метастатической ткани печени уровень выше, чем в нормальной.
• AURKB фосфорилирует гистон H3 по остаткам Ser10 и Ser28, что является отличительной чертой митоза и широко используемым маркером для исследования клеточного цикла (PubMed:11784863, PubMed:11856369). Связанные источники: PMID:11784863 PMID:11856369
• Дополнительные субстраты включают KIF2C, RACGAP1, VIM и p53/TP53, что связывает AURKB с разнообразными митотическими процессами и контролем контрольных точек клеточного цикла (PubMed:20959462). Связанные источники: PMID:20959462

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Использованный иммуноген представляет собой N-концевой пептид (аминокислоты 1–100) аурора B человека; для Вестерн-блоттинга денатурирующие условия могут улучшить доступность эпитопа. Неспецифические полосы можно минимизировать путем оптимизации блокировки и разведения антитела.
• В ИФ/ИКК аурора B проявляет динамическую локализацию во время митоза; протоколы фиксации и пермеабилизации следует валидировать для сохранения антигенности и доступа к центромерам/среднему телу.
• Для ИФА рекомендуется рассмотреть возможность использования антитела для захвата или детекции после подтверждения его связывания с рекомбинантным или нативным аурора B, с соответствующим титрованием и контрольными лунками.
• Валидация по нокдауну (KD) указывает на специфичность антитела, тем не менее, следует подтвердить реактивность в вашей системе проб с использованием соответствующих отрицательных контролей (например, нокаутных).
• Поскольку антитело перекрестно реагирует с мышиными и крысиными гомологами, его можно использовать в клеточных линиях и тканях грызунов, однако рекомендуется дополнительная валидация для конкретного вида.

CamelBio: Ваш универсальный мост по поиску реагентов

CamelBio — ваш комплексный партнер по закупке сырья для ИВД (in vitro диагностики), мы соединяем разработчиков диагностических систем с валидированными антителами, рекомбинантными белками и вспомогательными реагентами на всех этапах — от открытия до коммерциализации. Наш портфель поддерживает исследования митоза и биомаркеров рака за счет высококачественных, воспроизводимых инструментов. Для получения антител к аурора B и поиска реагентов к редким мишеням CamelBio предоставляет индивидуальные решения для оптимизации вашего процесса разработки анализов.