Кроличье моноклональное антитело к человеческому IgE для Вестерн-блоттинга, проточной цитометрии, ИФА - P01854

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая основа: Функция и локализация IgE

• IgE — это константная эпсилон-область тяжелой цепи иммуноглобулина, определяющая изотип IgE. Это гликопротеин с внутри- и межцепочечными дисульфидными связями.
• Антиген-связывающая специфичность IgE определяется вариабельными доменами, генерируемыми в результате V(D)J-рекомбинации и соматического гипермутирования, что обеспечивает высокоаффинное распознавание. Связанные ссылки: PMID:17576170, PMID:20176268
• Секретируемый IgE опосредует аллергические и противопаразитарные реакции, связываясь с высокоаффинным рецептором FCER1A на тучных клетках, базофилах и эозинофилах, что запускает дегрануляцию и высвобождение гистамина, лейкотриенов и цитокинов. Связанные ссылки: PMID:25629393, PMID:33840121, PMID:8114916, PMID:8551243
• IgE также взаимодействует с низкоаффинным рецептором FCER2 на макрофагах, стимулируя уничтожение паразитов, и на B-клетках, усиливая презентацию антигена. Связанные ссылки: PMID:7544003, PMID:2167225
• Мембраносвязанный IgE существует в виде длинных и коротких изоформ, формируя комплекс B-клеточного рецептора (BCR). Сшивание антигена с BCR контролирует выживание и дифференцировку IgE+ B-клеток.
• Экспрессия IgE преимущественно обнаруживается в B-лимфоцитах после стимуляции IL-4 и CD40, что связывает ее с иммунными ответами Th2-типа.
• Альтернативный сплайсинг гена IGHE генерирует секретируемую и две мембраносвязанные изоформы, каждая из которых обладает различными сигнальными свойствами.
• Дисрегулированные IgE-ответы способствуют развитию аллергических и анафилактических состояний. Связанные ссылки: PMID:25629393, PMID:33840121, PMID:7544003

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 104-428 константной области человеческого IgE, покрывая домены CH2-CH4. Такая конструкция обеспечивает распознавание Fc области, общей для секретируемых и мембраносвязанных изоформ.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) рассмотрите возможность использования восстанавливающих условий; наблюдаемая молекулярная масса может составлять ~47 кДа, как указано, но гликозилирование может смещать полосу или создавать размазанный след.
• В проточной цитометрии (FC) это антитело подходит для детекции мембраносвязанного IgE на B-клетках или IgE, захваченного Fc-рецепторами на базофилах/тучных клетках; рекомендуется использовать соответствующие изотипические контроли и этапы блокировки Fc-рецепторов.
• Для применения в ИФА это моноклональное антитело может служить в качестве улавливающего или детектирующего реагента для количественного определения общего IgE; оптимизируйте концентрацию для иммобилизации и используйте в паре с подходящим поликлональным или моноклональным детектирующим антителом к IgE.
• Поскольку концентрации IgE в сыворотке/плазме низкие, подготовку образцов и чувствительность анализа следует проверять с помощью калибровочных кривых с использованием очищенного белка IgE.

CamelBio: Ваш универсальный мост для поиска реагентов

CamelBio служит комплексным партнером по поставкам сырья для ИХА, поддерживая разработку ваших иммуноанализов на IgE от концепции до клиники. Помимо этого моноклонального антитела, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела и основные вспомогательные реагенты для диагностики аллергии и иммунологии. Свяжитесь с нами, чтобы обсудить индивидуальный поиск редких мишеней и техническое консультирование.