Кроличье моноклональное антитело к формил-гистону H2B-K120 (P62807/Q16778) для вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ELISA

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая основа: Функция и локализация формил-гистона H2B

Гистон H2B является основным компонентом нуклеосомы, где он оборачивает и компактизирует ДНК в хроматин, играя центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и хромосомной стабильности. Динамическая доступность ДНК регулируется "гистоновым кодом" — сложным набором посттрансляционных модификаций (ПТМ) гистонов. Связанные ссылки: UniProt P62807, UniProt Q16778

Гистон H2B человека подвергается обширным ПТМ, включая ацетилирование (например, по K6, K12, K16, K21), кротонилирование (K12), фосфорилирование (S15) и формилирование по K120. Формилирование по K120 — это новая модификация, которая может тонко влиять на архитектуру хроматина и экспрессию генов, хотя ее полное биологическое значение все еще активно исследуется. Связанные ссылки: PMID:16283522, PMID:16627869, PMID:21925322, PMID:12757711

Помимо структурной роли, H2B проявляет широкую антибактериальную активность и может вносить вклад в антимикробный барьер эпителия толстой кишки и бактерицидную активность амниотической жидкости. Связанные ссылки: UniProt P62807, UniProt Q16778

H2B локализуется преимущественно в ядре и ассоциирован с хромосомами. Геном человека кодирует несколько вариантов H2B, включая H2B тип 1-C/E/F/G/I (P62807) и H2B тип 2-E (Q16778), которые имеют высококонсервативные последовательности. Иммуногенный пептид охватывает область, консервативную среди этих изоформ, что подтверждает прогнозируемую широкую кросс-реактивность. Связанные ссылки: UniProt P62807, UniProt Q16778

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический пептид, соответствующий гистону H2B человека с формилированием по лизину 120. Ожидается, что антитело будет специфично распознавать формил-H2B-K120; для подтверждения специфичности рекомендуется использовать нефомилированный пептид или ферментативное деформилирование в качестве отрицательного контроля.
• Для вестерн-блоттинга (WB) ожидается полоса примерно на 14 кДа. Используйте ядерные экстракты или препараты, обогащенные гистонами. Рекомендуется включение низкомолекулярного маркера и контрольного образца (например, необработанный vs. обработанный ингибитором формилазы).
• Для иммуногистохимии (ИГХ-П) может потребоваться демаскировка антигена для экспозиции ядерного эпитопа в формалин-фиксированных парафиновых срезах. Следует наблюдать ядерное окрашивание; валидируйте с соответствующими тканевыми контролями.
• Для ELISA используйте формилированный пептид для иммобилизации и нефомилированный пептид в качестве контроля для оценки специфичности связывания. Оптимизируйте условия иммобилизации и разведение антител в зависимости от матрицы образца.
• Из-за высокой идентичности последовательностей антитело, как ожидается, будет кросс-реагировать с H2B человека, мыши и крысы; однако рекомендуется валидация на соответствующем виде и в соответствующей системе образцов.
• Избегайте неспецифичных блокирующих агентов, которые могут маскировать модификацию малой молекулы; при появлении фона можно рассмотреть без-BSA блокирующие растворы или альтернативные стратегии блокирования.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, исследовательским лабораториям и институтам комплексное решение для поставок сырья для ИВД, охватывающее каждый этап от концепции до клинического применения. Это кроличье моноклональное антитело к формил-гистону H2B-K120 (мишень P62807/Q16778) является примером нашей приверженности поставке высококачественных, валидированных антител для эпигенетических исследований и исследований хроматина. Помимо отдельных реагентов, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом, а также поиск сырья для редких мишеней, чтобы ускорить разработку и производство ваших тест-систем.