Моноклональное FITC-меченое кроличье антитело к CD45 человека/обезьяны для проточной цитометрии – P08575

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация CD45

• CD45, также известный как PTPRC, представляет собой тирозин-протеинфосфатазу рецепторного типа, которая является общим лейкоцитарным антигеном (L-CA или T200). Он выступает как положительный регулятор активации Т-клеток через антигенный рецептор при связывании с DPP4 и необходим для эффективной коактивации Т-клеток. Связанные источники: PMID:35767951
• Внеклеточная область содержит два фосфатазных домена: первый домен обладает ферментативной активностью, а второй модулирует специфичность к субстрату. CD45 дефосфорилирует ключевые сигнальные интермедиаты, такие как SKAP1, FYN и LYN, тем самым тонко регулируя пороги сигналинга через Т-клеточный рецептор.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ (1–8) с вариабельными внеклеточными доменами. В тимоцитах обнаруживаются изоформы 1, 2, 3, 5 и 7, тогда как изоформы 4, 6 и 8 отсутствуют, что указывает на строго регулируемую экспрессию изоформ в процессе развития Т-клеток.
• Субклеточная локализация CD45 включает клеточную мембрану, мембранные рафты и иммунологический синапс, где этот белок динамически взаимодействует с антигенпрезентирующими клетками для модуляции активации Т-клеток и ограничения аутореактивности.
• Будучи сильно гликозилированным и фосфорилированным белком, CD45 имеет кажущуюся молекулярную массу в диапазоне 131–147 кДа при электрофорезе в ПААГ, что отражает обширные посттрансляционные модификации, влияющие на его функцию и разнообразие изоформ.
• CD45 также участвует во взаимодействии хозяина и патогена: он выступает как рецептор для белка UL11 цитомегаловируса человека, что приводит к нарушению пролиферации Т-клеток при инфицировании вирусом.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для проточной цитометрии проведите титрование антитела, чтобы определить оптимальную концентрацию для вашего конкретного типа клеток и конфигурации прибора.
• Используйте мононуклеары периферической крови человека или суспензию лимфоцитов яванского макака как положительный контроль; CD45 высоко экспрессируется на всех субпопуляциях лейкоцитов, поэтому является надежным маркером для гейтирования.
• Включите этот конъюгат с FITC в мультицветные панели вместе с маркерами Т-клеток, В-клеток и миелоидных клеток для проведения полного иммунофенотипирования.
• Убедитесь, что проточный цитометр оснащен лазером 488 нм и подходящими фильтрами для детекции FITC.
• Для оценки неспецифического связывания используйте соответствующий контрол изотипа, а также проводите блокировку Fc-рецепторов, чтобы уменьшить неспецифическое связывание.
• Эпитоп, с которым связывается антитело, расположен во внеклеточном домене (а.к. 26–577), который присутствует во множестве изоформ CD45, что обеспечивает широкое распознавание лейкоцитов.

CamelBio: ваш универсальный посредник для закупки реагентов

CamelBio — это ваш надежный универсальный партнер по поставке сырья для ИВД (in vitro диагностики), мы предлагаем валидированные пары антител, моноклональные/поликлональные антитела, массовые партии вспомогательных реагентов и закупку реагентов к редким мишеням, чтобы ускорить разработку ваших тест-систем на основе CD45. Наши обширные возможности по поиску и поставке реагентов покрывают весь цикл разработки — от концепции до клинических испытаний — мы предоставляем производителям диагностикумов, лабораториям и научно-исследовательским институтам надежные реагенты для детекции лейкоцитарных маркеров и исследований иммунных клеток.