Кроличья pAb к EGFR для WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P00533

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация EGFR

• EGFR — это рецепторная тирозинкиназа, которая связывает лиганды семейства EGF (например, EGF, TGFA, AREG, BTC, эпирегулин, HBEGF) для регуляции пролиферации, выживания и дифференцировки клеток. Связанные ссылки: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• Связывание лиганда индуцирует димеризацию рецептора и аутофосфорилирование, активируя нисходящие каскады, включая пути RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K/AKT, PLCγ/PKC, STATs и NF-κB. Связанные ссылки: PMID:27153536, PMID:11116146
• EGFR также фосфорилирует субстраты, не являющиеся рецепторами, такие как RGS16 (модулирующий сигнальный путь G-белка) и MUC1 (усиливающий взаимодействия SRC/β-катенина). Связанные ссылки: PMID:11602604, PMID:11483589
• Рецептор локализуется преимущественно на клеточной мембране, но претерпевает транспорт в эндосомы, аппарат Гольджи, эндоплазматический ретикулум и ядро, обеспечивая пространственно регулируемую сигнализацию.
• Множественные посттрансляционные модификации (фосфорилирование, убиквитинирование, гидроксилирование, метилирование, пальмитоилирование) точно настраивают активность, стабильность и субклеточное распределение EGFR.
• Универсально экспрессируется в нормальных тканях; альтернативно сплайсированный изоформ 2 заметно обнаруживается в раке яичников и может функционировать как антагонист EGF.
• Помимо эндогенных лигандов, EGFR служит в качестве клеточного рецептора-хозяина для проникновения вируса гепатита C (HCV), способствуя вирусной интернализации.
• Признанный протоонкоген, дисрегуляция EGFR (сверхэкспрессия или активирующие мутации) способствует развитию многих видов рака, позиционируя его как центральную терапевтическую мишень.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (а.к. 1021–1210) находится внутри цитоплазматического домена, который сохраняется при общих денатурирующих условиях; рассмотрите возможность использования стандартного лизиса RIPA и восстанавливающего SDS-PAGE для вестерн-блоттинга с соответствующими положительными (например, A431, HeLa) и отрицательными клеточными линиями.
• Для IHC-P протоколы восстановления антигена (например, цитратный буфер pH 6.0 или Tris-EDTA pH 9.0) могут потребовать оптимизации, так как EGFR является трансмембранным гликопротеином, часто подверженным сильному N-гликозилированию.
• Хотя перекрестная реактивность зарегистрирована для человека, мыши и крысы, мы рекомендуем проверять видоспецифичную реактивность и специфичность сигнала в вашей экспериментальной системе, особенно при использовании генетически модифицированных моделей.
• Из-за большого молекулярного веса (~134 кДа) используйте 8% или градиентные гели SDS-PAGE и оптимизируйте условия переноса (например, ночной влажный перенос или полусухой с низким содержанием метанола) для вестерн-блоттинга.
• В экспериментах по иммунопреципитации (IP) предварительная очистка лизатов и использование контрольного изотипа кроличьего IgG могут помочь снизить неспецифическое связывание.
• При разработке ИФА (ELISA) использование этой поликлональной антитела в паре с моноклональным захватывающим антителом может улучшить чувствительность анализа; выполните шахматные титрации для определения оптимальных концентраций.

CamelBio: Ваш комплексный мост для закупок

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по закупкам для производителей диагностических средств и исследовательских лабораторий, предоставляя надежные реагенты для IVD, включая антитела, антигены и вспомогательные реагенты. Эта кроличья pAb к EGFR поддерживает исследования в области онкологии и трансдукции сигналов, и мы дополняем ее валидированными парами антител, оптимизированными моноклональными/поликлональными антителами, реагентами в больших объемами и индивидуальным поиском редких и труднодоступных мишеней. От концепции до клиники, CamelBio оптимизирует ваш рабочий процесс закупок для ускорения разработки диагностических средств.