Кроличье mAb к eEF2 - P13639

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация eEF2

• Катализирует GTP-зависимый шаг транслокации рибосомы во время трансляционной элонгации. На этом этапе рибосома переходит из пре-транслокационного (PRE) в пост-транслокационное (POST) состояние, когда вновь образованная пептидил-тРНК, связанная с A-сайтом, и деацилированная тРНК, связанная с P-сайтом, перемещаются на P и E сайты соответственно, что сопровождается движением мРНК и конформационными изменениями рибосомы. Связанные ссылки: PMID:26593721
• eEF2 — высококонсервативный 95 кДа GTP-связывающий белок, относящийся к семейству факторов элонгации-G, необходимый для биосинтеза белка.
• В основном локализуется в цитоплазме, где выполняет свою каноническую функцию, но также обнаруживается в ядре, что указывает на экстратрансляционные роли.
• Посттрансляционные модификации, включая фосфорилирование, ацетилирование, АДФ-рибозилирование, метилирование и убиквитин-подобную конъюгацию, регулируют активность и стабильность eEF2 в ответ на клеточные сигналы.
• Мутации в гене EEF2 вызывают спиноцеребеллярную атаксию 26 типа (SCA26) — нейродегенеративное заболевание, характеризующееся прогрессирующей моторной некоординацией.
• Структурные исследования выявляют консервативные нуклеотид-связывающие домены и динамические конформации, критически важные для связывания с рибосомой и транслокации.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген нацелен на C-концевую область (а.о. 759-858), что может облегчить детекцию полноразмерного eEF2 и потенциальных продуктов расщепления; проверяйте размер полосы примерно на 95 кДа в репрезентативных лизатах.
• Для Вестерн-блоттинга используйте стандартный гель SDS-PAGE (например, 8-10%) и мембрану PVDF или нитроцеллюлозную; рассмотрите возможность оптимизации условий блокирования (например, 5% обезжиренного молока или BSA) для снижения фона.
• При IHC-P и IF/ICC может потребоваться демаскировка антигена (цитратный или EDTA буфер) и пермеабилизация; тестируйте протоколы фиксации (формалин против метанола) для баланса между сохранением морфологии и доступностью эпитопа.
• Работа в ELISA зависит от формата анализа; будучи моноклональным антителом, оно может служить детектирующим или захватывающим реагентом; валидируйте линейность и чувствительность с использованием рекомбинантного eEF2 или клеточных лизатов.
• Перекрестная реактивность с мышиным и крысиным белком позволяет проводить трансляционные исследования на распространенных модельных организмах; подтверждайте специфичность с помощью контролей с нокдауном siRNA или нокаутом в вашей экспериментальной системе.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предлагает производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям оптимизированное решение для закупок высококачественных сырьевых материалов для ИХА из одного источника, включая валидированные пары антител и оптимизированные рекомбинантные антитела, такие как это моноклональное антитело к eEF2. Для анализаторов, нацеленных на трансляционную элонгацию или нейродегенерацию, связанную с eEF2, мы предоставляем вспомогательные реагенты в больших объемах, услуги по разработке антител на заказ и поиск редких мишеней для ускорения разработки ваших наборов. Наш строгий менеджмент цепочки поставок и техническая поддержка обеспечивают стабильную, масштабируемую производительность от концепции до клиники.