DNMT1 Кроличья pAb для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, IP, ELISA - P26358

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация DNMT1

• DNMT1 (ДНК (цитозин-5)-метилтрансфераза 1) является основной метилтрансферазой поддержания, которая копирует паттерны метилирования ДНК на вновь синтезированную цепь во время репликации ДНК, обеспечивая эпигенетическое наследование (PubMed:17200670, PubMed:21745816). Связанные ссылки: PMID:17200670, PMID:21745816

• DNMT1 предпочтительно метилирует гемиметилированные динуклеотиды CpG и необходима для точного воспроизведения паттернов метилирования во время клеточного деления (PubMed:21745816, PubMed:26070743). Связанные ссылки: PMID:21745816, PMID:26070743

• Помимо поддержания в процессе репликации, DNMT1 ассоциирует с хроматином во время фаз G2 и M для поддержания метилирования ДНК независимо от репликации (PubMed:21745816). Связанные ссылки: PMID:21745816

• DNMT1 опосредует транскрипционный репрессионный эффект напрямую через взаимодействие с HDAC2 и координирует метилирование ДНК с модификациями гистонов (PubMed:10888872, PubMed:16357870). Связанные ссылки: PMID:10888872, PMID:16357870

• В клетках колоректального рака DNMT1 формирует корепрессорный комплекс, который опосредует онкоген-индуцированное KRAS гиперметилирование промоторов и сайленсинг генов1-супрессоров опухолей (PubMed:24623306). Он также поддерживает транскрипционно репрессивное состояние генов в недифференцированных эмбриональных стволовых клетках (PubMed:24623306). Связанные ссылки: PMID:24623306

• DNMT1 экспрессируется повсеместно, с наибольшим уровнем в фетальных тканях, сердце, почках, плаценте и мононуклеарных клетках периферической крови, и более низким уровнем в селезенке, легких, мозге, тонком кишечнике, толстой кишке, печени и скелетных мышцах. Изоформа 2 менее распространена, чем изоформа 1.

• DNMT1 содержит CXXC-тип цинкового пальцевого домена и подвергается регуляторным посттрансляционным модификациям, таким как ацетилирование, фосфорилирование и метилирование.

• DNMT1 локализуется в ядре и ассоциирует с хромосомами, что соответствует его роли в поддержании метилирования и транскрипционной регуляции.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген покрывает C-концевую область (а.о. 760-1109) человеческого DNMT1, которая включает каталитический метилтрансферазный домен; такая конструкция нацелена на активный сайт и может улучшить детекцию полноразмерного DNMT1.
• При Вестерн-блоттинге ожидайте полосу примерно на 183 кДа; использование геля SDS-PAGE с низким процентом (например, 6–8%) и увеличенного времени переноса может помочь разрешить этот высокомолекулярный белок.
• Уровни экспрессии DNMT1 варьируются в зависимости от типа клеток и тканей; валидируйте работу антитела в вашей конкретной системе образцов, используя соответствующие положительные (например, HeLa, HEK293) и отрицательные контроли.
• Для иммунопреципитации оптимизируйте концентрацию антитела и рассмотрите возможность сшивания с шариками для уменьшения интерференции тяжелой цепи IgG на уровне ~50 кДа.
• При иммунофлуоресценции/ICC требуется пермеабилизация ядра (например, с Triton X-100) и соответствующая фиксация для доступа к ядерным антигенам; совместное окрашивание с ядерным маркером может подтвердить локализацию.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, исследовательским лабораториям и академическим институтам беспрепятственный доступ к премиальным сырьевым материалам для IVD. Это поликлональное антитело к DNMT1 является частью комплексного портфолио, которое включает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, объемные вспомогательные реагенты и поставки редких мишеней для исследований в области эпигенетики и онкологии. Свяжитесь с нами, чтобы узнать, как техническое обслуживание и консультационные услуги CamelBio могут поддержать ваш проект от концепции до клиники.