Кроличьи поликлональные антитела к диметилированному гистону H3-K27 (Q16695/P68431) для эпигенетических исследований и ChIP

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическое обоснование: функции и локализация гистона H3

Гистона H3 является основным компонентом нуклеосомы, фундаментальной единицы хроматина. Нуклеосомы упаковывают и уплотняют ДНК, ограничивая доступ к ней клеточного аппарата и тем самым играя центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и стабильности хромосом.

Гистона H3 подвергается широкому спектру посттрансляционных модификаций (ПТМ), включая ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, цитруллинирование и многие другие, которые в совокупности называются «гистоновым кодом». Эти модификации динамически регулируют структуру хроматина и экспрессию генов. N-концевой хвост гистона H3 особенно богат модифицируемыми остатками, причем лизин 27 (K27) является критическим сайтом для процессов метилирования. Диметилирование H3K27 (H3K27me2) связано с репрессией транскрипции и поддержанием гетерохроматина.

Геном человека кодирует несколько вариантов гистона H3. Q16695 (H3-4, также известный как H3.1t) — это специфичный для яичек гистон, экспрессируемый преимущественно в тестикулярных клетках, в то время как P68431 (H3C1/H3C2/H3C3/H3C4/H3C6/H3C7/H3C8/H3C10/H3C11/H3C12) представляет собой канонические варианты H3.1, зависящие от репликации и экспрессируемые в соматических клетках. Оба варианта высококонсервативны и имеют идентичные N-концевые последовательности, где расположен K27. Они локализуются исключительно в ядре и хромосомах, где составляют неотъемлемую часть хроматиновых волокон.

Сопутствующие ссылки: UniProt Q16695, UniProt P68431

Рекомендации по проведению экспериментов и технические советы

• Для вестерн-блоттинга (WB) ожидается появление одной полосы около 15 кДа, соответствующей гистону H3. Используйте соответствующие положительные и отрицательные контроли для подтверждения идентичности полосы и специфичности диметилирования.
• Для ChIP и ChIP-seq оптимизируйте условия сшивки (например, формальдегидом) и фрагментации хроматина. Рассмотрите возможность валидации обогащения известных локусов-мишеней H3K27me2 с помощью qPCR или параллельного секвенирования.
• Антитела перекрестно реагируют с образцами человека, мыши и крысы, и прогнозируется их широкая реактивность. Однако перед проведением крупномасштабных экспериментов рекомендуется подтвердить эффективность работы на конкретном виде и типе ткани.
• Для ELISA и дот-блоттинга (DB) титруйте антитела и используйте этапы блокировки для минимизации неспецифического связывания; пептидный иммуноген может служить положительным контролем.
• При иммуногистохимии (IHC) и иммунофлуоресценции (IF/ICC) обратите внимание, что гистон H3 находится в ядре; контркраситель (например, DAPI) поможет визуализировать ядерную локализацию. Может потребоваться демаскировка антигенов (антиген-ретривал).

CamelBio: ваш универсальный партнер по снабжению

CamelBio предоставляет производителям IVD и исследовательским лабораториям комплексную цепочку поставок сырья — от концепции до клиники. Наряду с этими антителами к диметилированному гистону H3-K27 для эпигенетических исследований и исследований хроматина, мы предлагаем полный портфель валидированных пар антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и возможности поиска редких мишеней. Сотрудничайте с CamelBio, чтобы оптимизировать закупки диагностического сырья и ускорить разработку ваших тест-систем.