Расщепленный PARP (Asp214) кроличья pAb - Q921K2

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация поли-[ADP-рибоз]-полимеразы

• Ключевой фермент репарации ДНК: PARP1 опосредует поли-ADP-рибозилирование (PARylation) белков-мишеней в ответ на повреждение ДНК, рекрутируя репаративный механизм к одноцепочечным разрывам.
• Маркер апоптоза: Во время апоптоза каспаза-3 и каспаза-7 расщепляют полную форму PARP1 (113 кДа) в позиции Asp214, генерируя фрагмент 89 кДа, который необратимо связывается с разрывами ДНК и блокирует репарацию, способствуя запрограммированной гибели клетки.
• Апоптоз, опосредованный AIFM1: Расщепленный фрагмент подвергается ауто-PARylation и выступает в качестве переносчика поли-ADP-рибозы, запуская транслокацию AIFM1 из митохондрий в ядро для индуцирования масштабной фрагментации ДНК.
• Субклеточное распределение: Локализуется преимущественно в ядре (нуклеоплазма и ядрышко) и ассоциируется с хроматином; после расщепления фрагмент транслокируется в цитозоль.
• Функциональные домены: Содержит мотивы «цинковые пальцы» для связывания с ДНК, домен аутомодификации и C-концевой каталитический домен, использующий NAD+ в качестве субстрата.
• Генное семейство: Принадлежит к суперсемейству PARP; Parp1 (Adprt1) является основоположником. Также известен как ADPRT, ARTD1 и PPOL.
• Посттрансляционные модификации: Обширная ауто-поли-ADP-рибозилирование модулирует собственную активность и служит платформой для других факторов репарации. Расщепление каспазами является ключевым регуляторным событием.
• Ключевые слова: ADP-рибозилирование, аллостерический фермент, апоптоз, хромосома, цитоплазма, повреждение ДНК, репарация ДНК, связывание с ДНК, гликозилтрансфераза, иммунитет, врожденный иммунитет, изопептидная связь, связывание металла, NAD, нуклеотидилтрансфераза, ядро, идентификация протеомики, повтор, транскрипция, регуляция транскрипции, трансфераза, цинк, цинковый палец.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген охватывает остатки 201-300 PARP1 мыши, включая сайт расщепления каспазой-3/7 в позиции Asp214. Такая конструкция обеспечивает специфическое распознавание расщепленной формы в экспериментах по апоптозу.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) используйте лизаты клеток или тканей мыши, обработанных индукторами апоптоза (например, стауроспорином, этопозидом), для усиления сигнала. Полноценный белок мигрирует при ~113 кДа, а расщепленный фрагмент появляется при ~89 кДа.
• Для ИФА (ELISA) рассмотрите возможность использования антитела в качестве реагента для захвата или детекции в сэндвич-анализах; сочетание с пан-PARP антителом позволяет дифференцировать расщепленную и общую формы PARP.
• Проверьте специфичность антитела, используя клеточные линии с нокаутом PARP1 или контроли с ингибиторами каспаз, чтобы подтвердить исчезновение обнаруживаемой полосы в неапоптотических условиях.
• Избегайте повторных циклов замораживания-размораживания для сохранения целостности антитела; краткосрочное хранение при 4°C допустимо, но для долгосрочного хранения рекомендуется -20°C или ниже.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексный доступ к реагентам для IVD, техническим услугам и консалтингу — охватывая все этапы от концепции до клиники. Это кроличье pAb против расщепленного PARP (Asp214) подходит для исследований апоптоза и повреждения ДНК. Помимо этого продукта, мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и специализированный поиск редких мишеней для поддержки ваших потребностей в разработке и производстве анализов.