Кроличья моноклональная антитело к цитруллину-гистону H3 (цитруллинация R8) (Q16695/P68431) для ВБ, ДБ, ИФА

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация гистона H3

Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, отвечающим за упаковку и компактизацию ДНК в хроматин. Эта структурная роль критически важна для регуляции доступности ДНК и поэтому контролирует фундаментальные процессы: транскрипцию, репарацию ДНК, репликацию и стабильность хромосом. Гистоны, включая H3, подвергаются сложному набору посттрансляционных модификаций — часто называемых «гистоновым кодом» — которые динамически модулируют структуру хроматина и экспрессию генов.

Данная антитела специфически детектирует цитруллинацию по аргинину 8 (R8) гистона H3. Цитруллинация — процесс превращения аргинина в цитруллин — опосредуется пептидиларгининдеиминазами (ПАД) и участвует в регуляции генов, НЕТозе и развитии аутоиммунных заболеваний. Известно, что гистон H3 подвергается цитруллинации по нескольким остаткам, включая R3, R8, R17 и R26, и эти модификации могут влиять на компакцию хроматина. Связанные публикации: PMID:16567635.

Две позиции SWISS-PROT, которые покрывает данная антитела — Q16695 (гистон H3.1t) и P68431 (гистон H3.1) — представляют собой различные варианты гистона. Q16695 является тестис-специфичным вариантом H3, экспрессирующимся в клетках яичка, тогда как P68431 соответствует каноническому репликационно-зависимому гистону H3.1, который экспрессируется во всех тканях. Оба варианта локализуются в ядре и на хромосомах.

Гистон H3 имеет множество модификаций на своем N-концевом хвосте, включая ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, цитруллинацию и многие другие метки. Эти модификации динамически регулируются и служат сайтами связывания для хроматин-модифицирующих комплексов, определяя клеточную идентичность и ответ на внешние сигналы.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для вестерн-блота (ВБ) рекомендуется использовать 10–20 мкг лизата цельных клеток на лунку. Валидируйте антитело в соответствующей системе образцов (например, стимулированные клетки с индуцированной цитруллинацией) и используйте подходящие положительные и отрицательные контроли.
• Для дот-блота (ДБ) и ИФА оптимизируйте концентрацию покрытия антигеном и условия буфера для обеспечения специфической детекции цитруллинированного гистона H3. Синтетический цитруллинированный пептид региона R8 можно использовать в качестве положительного контроля.
• Поскольку цитруллинация может быть транзиторной и зависимой от ферментов, при подготовке образцов необходимо сохранить посттрансляционные модификации; рекомендуется использовать ингибиторы ПАД или немедленный лизис с добавлением соответствующих ингибиторов фосфатаз и протеаз.
• Данная кроличья моноклональная антитела может быть использована для исследования динамики цитруллинации в различных типах образцов человека; перекрестная реактивность с другими видами предсказана в широком диапазоне, но пользователям следует самостоятельно проверить ее в своих конкретных экспериментальных моделях.

CamelBio: ваш универсальный мост для поиска материалов

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов, лабораториям и научно-исследовательским институтам упрощенный доступ к сырью для ИВД, включая специализированные антитела, такие как данная кроличья моноклональная антитело к цитруллину-гистону H3-R8 для эпигенетических исследований и изучения цитруллинации. Наша универсальная платформа предлагает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, объемные поставки вспомогательных реагентов и решения по поиску сырья для редких мишеней, поддерживая разработку ваших ИВД от концепции до клинических испытаний.