Кроличий поликлональный антитело против CAST для Вестерн-блоттинга, ИФА - P20810

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация кальпастатина

• Кальпастатин (CAST) — специфический эндогенный ингибитор кальпаина, семейства кальций-зависимых цистеиновых протеаз (КФ 3.4.22.-), участвующих в ремоделировании цитоскелета, передаче сигналов и апоптозе.
• Прочно связывая и ингибируя кальпаин, кальпастатин регулирует протеазную активность в мышечной ткани, играя ключевую роль в посмертном размягчении мяса и, возможно, в контроле деградации мышечных белков в живых клетках.
• Ген CAST подвергается обширному альтернативному сплайсингу, генерируя множество изоформ с различным тканевым распределением и ингибиторной способностью.
• Кальпастатин содержит четыре повторяющихся ингибиторных домена (L-домены), каждый из которых способен независимо ингибировать кальпаин, а также N-концевой домен L и C-концевой хвост; эта многоповторная архитектура лежит в основе его мощного и кооперативного ингибирования протеаз.
• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование, фосфорилирование, убиквитинирование и образование изопептидных связей, которые могут модулировать стабильность белка, его локализацию и эффективность ингибирования.
• Экспрессия кальпастатина обнаруживается в широком спектре тканей, с известным присутствием в сперматозоидах (как компонент BS-17) и ассоциацией с болезнью — ладонно-подошвенной кератодермией.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический пептид, охватывающий аминокислоты 510–610 человеческого CAST; реактивность антител может зависеть от используемой изоформы или посттрансляционных модификаций в этой области.
• Для Вестерн-блоттинга рекомендуется оптимизировать концентрацию первичного антитела (например, 1:500–1:2000) и использовать соответствующие положительные контроли, такие как лизаты HeLa, HEK293 или скелетных мышц, где кальпастатин экспрессируется эндогенно.
• Антитело перекрестно реагирует с мышиным и крысиным белком; проверьте характер полос у этих видов, так как молекулярные массы могут незначительно отличаться из-за вариаций изоформ.
• Для ИФА титруйте антитело против пептида-иммуногена или полноразмерного рекомбинантного белка для установления рабочих концентраций; используйте соответствующие блокирующие и промывочные этапы для снижения фона.
• Поскольку это поликлональное антитело, оно может детектировать несколько изоформ кальпастатина; подтвердите специфичность с помощью экспериментов по нокдауну siRNA или сверхэкспрессии в соответствующих клеточных моделях.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio поддерживает производителей диагностических средств, лаборатории и научно-исследовательские институты, предоставляя единый доступ к валидированным сырьевым материалам для ИВД, упрощая разработку от концепции до клиники. Для исследований кальпастатина мы предлагаем кроличьи поликлональные антитела, такие как данное антитело против CAST, а также подобранные пары антигенов, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты оптом. Свяжитесь с нашей командой для заказа индивидуализированных моноклональных/поликлональных антител, труднодоступных мишеней для ингибиторов протеаз или полных наборов для разработки иммуноанализа.