Поликлональное кроличье антитело к ATP6V1A для WB, ELISA — P38606

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация ATP6V1A

• ATP6V1A кодирует каталитическую субъединицу A V1-домена вакуолярной H+-АТФазы (V-АТФазы) — мультисубъединичного фермента, который сопрягает гидролиз АТФ с переносом протонов (PMID:8463241, PMID:22053050). Известные альтернативные названия включают субъединицу V-АТФазы массой 69 кДа, изоформу VA68 вакуолярной АТФазы и альфа-субъединицу вакуолярного протонного насоса. Связанные ссылки: PMID:8463241 PMID:22053050

• Комплекс V-АТФазы необходим для подкисления внутриклеточных компартментов и поддержания в них pH; в некоторых типах клеток он локализуется на плазматической мембране, способствуя внеклеточному подкислению (PMID:32001091). Связанные ссылки: PMID:32001091

• На мембране лизосом V-АТФаза активирует mTORC1, стимулируя активность комплекса Ragulator как фактора обмена гуаниновых нуклеотидов (PMID:22053050). Связанные ссылки: PMID:22053050

• В аэробных условиях ATP6V1A участвует в поддержании внутриклеточного гомеостаза железа, активируя ферменты пролилгидроксилазы Fe(2+), которые гидроксилируют HIF1A и маркируют его для протеасомной деградации (PMID:28296633). Связанные ссылки: PMID:28296633

• Белок может участвовать в развитии нейритов и формировании синаптических связей (PMID:29668857). Связанные ссылки: PMID:29668857

• ATP6V1A преимущественно находится в цитозоле, но также локализуется в клатрин-покрытых везикулах, секреторных везикулах и мембранах лизосом.

• Высокая экспрессия белка наблюдается в коже. Посттрансляционные модификации включают ацетилирование и фосфорилирование, а альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ. Ген связан с такими заболеваниями, как эпилепсия.

• Во время инфекции вирусом бешенства ATP6V1A способствует распаковке вирионов, взаимодействуя с вирусными матричными белками M.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический пептид, соответствующий аминокислотам 500–600 человеческого ATP6V1A (NP_001681.2). Этот участок может быть консервативным у разных видов, что согласуется с заявленной перекрёстной реактивностью с мышью.

• Для вестерн-блоттинга ожидается полоса, мигрирующая в области 68 кДа. Специфичность антитела следует подтверждать с использованием контролей с нокдауном или нокаутом в соответствующей клеточной или тканевой системе.

• Условия ELISA следует оптимизировать с использованием рекомбинантного белка ATP6V1A или стандартов пептида; неспецифическое связывание можно уменьшить с помощью подходящих блокирующих буферов.

• Поскольку V-АТФаза экспрессируется повсеместно, но обогащена в коже, лизаты человеческих кератиноцитов или фибробластов могут использоваться в качестве положительных контролей.

• При расширении применения до ИГХ или ИФ следует учитывать расположение целевого эпитопа антитела в контексте свернутого белка и проверять эффективность в нативных условиях.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по снабжению

CamelBio предлагает комплексные решения по сырью для ИВД для исследований аутофагии, биологии лизосом и транспорта ионов. Мы предоставляем валидированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты для ускорения разработки ваших анализов. Независимо от того, нужны ли вам поликлональные антитела в больших объёмах, такие как это антитело к ATP6V1A, оптимизированные моноклональные альтернативы или поддержка в работе с редкими мишенями, наша команда обеспечивает стабильное качество и надёжные поставки — от концепции до клинического применения.