APC/цианин7-конъюгированное кроличье моноклональное антитело против CD45 мыши для проточной цитометрии — P06800

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая характеристика: функция и локализация CD45

• Рецептороподобная тирозин-протеинфосфатаза C (CD45), кодируемая геном PTPRC, представляет собой трансмембранную фосфатазу, необходимую для передачи сигналов в иммунных клетках. Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ (например, CD45R, B220) с различающимися внеклеточными доменами.
• CD45 необходим для активации T-клеток через антигенный рецептор, действуя как положительный регулятор при связывании с DPP4. Он регулирует порог передачи сигналов через T-клеточный рецептор.
• Внутриклеточная область содержит два домена тирозин-протеинфосфатазы (PTP); первый обладает каталитической активностью, тогда как второй влияет на специфичность к субстратам и активность.
• CD45 дефосфорилирует киназы семейства Src, такие как LYN, FYN и LCK, тем самым регулируя их киназную активность и последующие сигнальные каскады в лимфоцитах.
• Взаимодействие с CLEC10A на антигенпредставляющих клетках (например, незрелых дендритных клетках) тонко регулирует активацию T-клеток, способствуя поддержанию аутотолерантности.
• CD45 локализуется в клеточной мембране и обогащён в мембранных рафтах и иммунологическом синапсе, что обеспечивает его участие в интеграции рецепторных сигналов.
• Посттрансляционные модификации включают обширное N- и O-связанное гликозилирование, влияющее на экспрессию изоформ и белок-белковые взаимодействия.
• CD45, также известный как общий лейкоцитарный антиген (L-CA) и Ly-5, широко экспрессируется во всех ядерных гемопоэтических клетках; характерные для изоформ паттерны экспрессии позволяют различать субпопуляции лейкоцитов.

Рекомендации по эксперименту и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 26–566 CD45 мыши, включая значительную часть внеклеточного домена. Такая конструкция, вероятно, позволяет распознавать несколько изоформ CD45, однако пользователям следует проверить специфичность к изоформам в своей системе.
• Для проточной цитометрии проведите титрование APC/цианин7-конъюгированного антитела на лейкоцитах мыши, чтобы определить оптимальную концентрацию окрашивания, и включите соответствующие изотипический контроль и контроль FMO (без одного флуорохрома).
• APC/цианин7 испускает сигнал в дальнекрасном диапазоне (~780 нм), обеспечивая чёткое разделение с распространёнными флуорофорами, такими как FITC, PE и APC. Используйте совместимую лазерную линию (например, возбуждение при 633 нм) и соответствующие наборы фильтров.
• Из-за высокой экспрессии CD45 на лейкоцитах избегайте чрезмерного окрашивания, которое может привести к неспецифическому связыванию; типичное начальное разведение 0,25–1,0 мкг на миллион клеток для проточной цитометрии может служить разумной отправной точкой.
• При разработке панели рассматривайте CD45 как панлейкоцитарный маркер для гейтирования живых иммунных клеток, а затем комбинируйте его с антителами к маркерам отдельных линий (например, CD3, CD19) для иммунофенотипирования.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по поиску решений

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и исследовательским институтам комплексный доступ к сырью для IVD, техническим услугам и консультационной поддержке, охватывая все этапы — от концепции до клинического применения. Это моноклональное антитело против CD45 подходит для иммунологических исследований, разработки диагностических тестов и профилирования иммунных клеток. Помимо этого продукта, мы предлагаем валидированные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и услуги индивидуального поиска редких мишеней, обеспечивая ваши проекты надёжными и масштабируемыми решениями в области снабжения.