Моноклональное антитело APC/Cyanine7 к HLA-DRA для проточной цитометрии — P01903

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая информация: функция и локализация HLA-DRA

• Ген HLA-DRA кодирует альфа-цепь молекулы главного комплекса гистосовместимости (MHC) класса II HLA-DR, которая образует функциональные гетеродимеры с бета-цепью (HLA-DRB) на поверхности антигенпрезентирующих клеток. Этот комплекс презентирует пептидные антигены CD4+ Т-клеткам, регулируя эффекторные функции Т-хелперов, антительные ответы и активацию макрофагов (PubMed:15265931, PubMed:15322540, PubMed:17334368). Связанные источники: PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• Обычно HLA-DR презентирует внеклеточные пептиды длиной 10–30 аминокислот, полученные из эндоцитозированных и лизосомально обработанных антигенов, при этом гидрофобный анкерный остаток в положении 1 критически важен для связывания (PubMed:8145819). Связанные источники: PMID:8145819
• В опухолевом микроокружении HLA-DR презентирует пептиды из апоптотических опухолевых клеток или секретируемых опухолевых белков, захваченных антигенпрезентирующими клетками, влияя на противоопухолевый иммунитет (PubMed:31495665). Связанные источники: PMID:31495665
• Кроме того, HLA-DR презентирует пептиды из внутриклеточных белков путем макроаутофагии — процесс, необходимый для тимческой селекции Т-клеток и поддержания центральной иммунной толерантности (PubMed:17182262, PubMed:23783831). Связанные источники: PMID:17182262 PMID:23783831
• Субклеточная локализация включает клеточную мембрану, мембраны эндосом/лизосом и аутофаголизосом, что отражает его динамическую роль в обработке и презентации антигенов.
• Экспрессируется на профессиональных антигенпрезентирующих клетках (макрофагах, дендритных клетках, В-клетках) и тимческих эпителиальных клетках (на уровне белка) (PubMed:15322540, PubMed:23783831, PubMed:31495665). Связанные источники: PMID:15322540 PMID:23783831 PMID:31495665
• Белок имеет N-концевую сигнальную последовательность, единственную трансмембранную спираль и две дисульфидные связи во внеклеточном домене; он подвергается N-связанному гликозилированию и может быть убивитинирован.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Это конъюгированное с APC/Cyanine7 моноклональное антитело получено против рекомбинантного человеческого HLA-DR; оно, вероятно, распознает конформационный эпитоп. Для проточной цитометрии используйте стандартные протоколы поверхностного окрашивания на живых клетках, поддерживая низкую температуру антител и клеток для предотвращения интернализации антигена.
• Учитывая консервативную перекрестную реактивность с яванским макаком, рекомендуется провести титрование для образцов как человека, так и приматов, не относящихся к человеку, чтобы определить оптимальную рабочую концентрацию.
• Для минимизации неспецифического связывания в образцах, богатых миелоидными клетками, включите стадию блокировки Fc-рецепторов (например, с помощью человеческого TruStain FcX или аналогичного реагента) и соответствующие контролей изотипа.
• Полоса 29 кДа (цепь HLA-DRA) обычно детектируется как часть гетеродимера α/β MHC класса II на поверхности клеток; в восстановительных условиях альфа-цепь может иметь несколько большую кажущуюся молекулярную массу из-за гликозилирования.
• Для внутриклеточного окрашивания требуется мягкая фиксация/пермеабилизация; валидируйте протокол для вашей системы образцов, так как эпитоп может быть чувствителен к агрессивным обработкам.

CamelBio: ваш универсальный мост по поставкам реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и научным лабораториям полный доступ к сырью для производства ИВД, включая валидированные пары антител, моноклональные и поликлональные антитела и крупные партии вспомогательных реагентов для иммунофенотипирования и исследований MHC. Данный продукт против HLA-DRA предназначен для применения в проточной цитометрии при иммунном профилировании человека и нечеловеческих приматов. Мы также специализируемся на поставках сырья для редких мишеней, поддерживая все этапы вашей работы от идеи до клинических исследований с помощью экспертной технической консультации.