Моноклональное антитело кролика против человеческого NT5E/CD73, конъюгированное АПС, для проточной цитометрии — P21589

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация NT5E/CD73

• Основная ферментативная активность: NT5E/CD73 — это 5'-нуклеотидаза, которая гидролизует внеклеточные нуклеозидмонофосфаты до нуклеозидов и неорганического фосфата, с сильно выраженной предпочтительностью АМФ перед другими субстратами. Эта стадия является лимитирующей скорость образования иммуносупрессивного аденозина из АТФ.
  Связанные публикации:
  PMID:21933152 PMID:22997138 PMID:23142347 PMID:34403084
• Специфичность к субстратам: Помимо АМФ, фермент также может взаимодействовать с ИМФ, УМФ, ГМФ, ЦМФ и несколькими дезоксинуклеотидами (дАМФ, дЦМФ, дТМФ), а также с НАД и НМН, хотя рибонуклеотидмонофосфаты являются предпочтительными субстратами.
• Субклеточная локализация: CD73 прикреплен к внешнему слою плазматической мембраны с помощью С-концевого гликозилфосфатидилинозитолного (GPI) якоря, благодаря чему его активный центр находится во внеклеточном пространстве и регулирует пулы нуклеотидов в периклеточном пространстве.
• Посттрансляционные модификации: Белок подвергается N-гликозилированию и содержит дисульфидные связи, важные для формирования правильной структуры. Прикрепление к мембране полностью зависит от GPI-якоря.
• Структурные особенности: Белок принадлежит к семейству 5'-нуклеотидаз, для каталитической активности требует ионов цинка и других двухвалентных металлов. На поверхности клетки существует в виде гомодимера.
• Связь с заболеваниями: Мутации в гене NT5E ассоциированы с кальцинозом артерий, обусловленным дефицитом CD73 (ACDC) — редким генетическим заболеванием. Кроме того, белок является важной мишенью иммунных контрольных точек в онкологии.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает весь экстрацеллюлярный домен (аминокислоты 27–547), который включает каталитический и субстратсвязывающий участки. Такая конструкция способствует узнаванию нативного, правильно свернутого CD73 на живых клетках.
• Для проточной цитометрии рекомендуется титровать антитело для определения оптимальной концентрации окрашивания для вашего типа клеток. Не забывайте использовать подходящие изотипные контроли и красители для оценки жизнеспособности клеток.
• В некоторых экспериментальных системах CD73 отщепляется или высвобождается в составе внеклеточных везикул; убедитесь, что при подготовке образца повреждение клеток сведено к минимуму, чтобы избежать ложноотрицательных сигналов.
• Данный конъюгат с АПС хорошо подходит для мультиплексных панелей; проверяйте настройки компенсации при совместном использовании с другими флуорофорами.

CamelBio: Ваш универсальный мост по закупке реагентов

CamelBio поддерживает производителей диагностических тестов и исследовательские группы полным портфелем сырьевых материалов для ИВД, включая валидированные пары антител, моноклональные/поликлональные антитела и объемные вспомогательные реагенты. Для мишеней иммуноонкологии, таких как CD73, мы предлагаем индивидуальный подбор реагентов и технические консультации, чтобы оптимизировать разработку тестов от концепции до клинических испытаний. Свяжитесь с нашей командой, чтобы обсудить, как мы можем удовлетворить ваши индивидуальные требования к антителам против CD73 и безопасно масштабировать ваше производство.