Моноклональное антитело APC против человеческого TLR3 для проточной цитометрии – O15455

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация TLR3

• Toll-подобный рецептор 3 (TLR3), также известный как CD283, IIAE2 и IMD83, представляет собой однопроходный мембранный белок типа I, принадлежащий к семейству Toll-подобных рецепторов. Характерной особенностью этого семейства являются лейцин-богатые повторения (LRR) во внеклеточном домене и Toll/интерлейкин-1 рецепторный домен (TIR) в цитоплазматической части.
• TLR3 является ключевым компонентом как врожденного, так и адаптивного иммунитета, функционируя как рецептор распознавания паттернов, который обнаруживает двухцепочечную РНК (дцРНК) – молекулярный признак вирусной инфекции, запуская тем самым противовирусный иммунный ответ.
• При связывании дцРНК в эндосомах TLR3 передает сигнал исключительно через адаптерный белок TRIF (TICAM1), который активирует транскрипционные факторы NF-kappa-B и IRF3, что приводит к продукции интерферонов типа I и провоспалительных цитокинов.
• Субклеточно TLR3 локализуется преимущественно в мембране эндоплазматической сети, мембране эндосом и ранних эндосомах, что позволяет ему обнаруживать вирусную дцРНК, высвобождаемую во время ацидификации эндосом.
• TLR3 высоко экспрессируется в плаценте и поджелудочной железе, а также в большом количестве содержится в незрелых дендритных клетках CD11c+; примечательно, что это самый интенсивно экспрессируемый TLR в мозге, особенно в астроцитах, глии и нейронах.
• Белок подвергается посттрансляционным модификациям, включая гликозилирование, фосфорилирование и конъюгацию с убиквитином, которые регулируют его транспорт и сигнальную активность.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ, а мутации в гене TLR3 ассоциированы с иммунодефицитом и повышенной восприимчивостью к герпесвирусному энцефалиту.
• С молекулярной массой около 104 кДа TLR3 содержит несколько дисульфидных связей, стабилизирующих его соленоидообразный LRR-эктодомен, необходимый для распознавания лиганда.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевой внеклеточной области (аминокислоты 24–339), которая включает несколько модулей LRR; убедитесь, что антитело распознает нативную конформацию, если вы используете его для окрашивания клеточной поверхности или эндосом в неденатурирующих условиях.
• Для внутриклеточной проточной цитометрии (ФЦ) требуется пермеабилизация; протестируйте протоколы фиксации и пермеабилизации (например, с использованием сапонина или Тритон X-100) для оптимальной экспозиции эпитопа при сохранении стабильности флуорофора.
• В покоящихся клетках экспрессия TLR3 преимущественно внутриклеточная; стимуляция дцРНК или вирусная инфекция может приводить к повышению регуляции и перераспределению рецептора, поэтому рекомендуется использовать соответствующие положительные контролы, например PBMC или дендритные клетки, обработанные poly(I:C).
• Перекрестная реактивность с другими видами не описана; валидируйте детекцию в целевой матрице образца, особенно учитывая высокую экспрессию TLR3 в тканях плаценты и мозга.
• Конъюгат с АФК обеспечивает яркий сигнал для проточной цитометрии; используйте подходящие компенсационные контроли и избегайте длительного воздействия света для предотвращения фотобелеснения.

CamelBio: Ваш единый центр снабжения

CamelBio оптимизирует процесс закупки сырья для производителей медицинских изделий in vitro, предлагая обширный портфель валидированных антител, рекомбинантных белков и вспомогательных реагентов. Это антитело против TLR3, предназначенное для исследований в области врожденного иммунитета и вирусной патогенеза, входит в обширный каталог CamelBio, разработанный для ускорения разработки тест-систем и производства диагностических препаратов. Благодаря глобальной сети поставок и техническим консультациям CamelBio обеспечивает эффективный доступ к специализированному сырью – от ранних этапов открытия до клинического применения.