Кроличье поликлональное антитело против ZWINT для вестерн-блоттинга, иммунофлуоресценции/ИЦХ, ИФА - O95229

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация ZWINT

• ZWINT, также известный как SIP30, ZWINT1, KNTC2AP, HZwint-1, является компонентом внешнего кинетохорного комплекса KNL1, который служит точкой связывания для компонентов контрольной точки сборки веретена и опосредует взаимодействия микротрубочек с кинетохорой. Связанные ссылки: PMID:15094189 PMID:15485811 PMID:15824131
• Это субъединица сети KMN (комплексы MIS12, NDC80, KNL1), которая формирует внешний кинетохор, соединяя центромерную ДНК с микротрубочками веретена и рекрутируя белки митотической контрольной точки. Связанные ссылки: PMID:15094189 PMID:15485811 PMID:15824131
• ZWINT направляет комплекс RZZ к кинетохоре в прометафазе (PubMed:15485811) и рекрутирует MAD2L1 (по сходству), способствуя активации контрольной точки сборки веретена. Связанные ссылки: PMID:15485811
• Помимо митоза, ZWINT необходим для правильного выравнивания гомологичных хромосом во время мейотической метафазы I и активирует контрольную точку сборки веретена на неприкрепленных кинетохорах в мейозе I. Связанные ссылки: PMID:15485811
• На субклеточном уровне ZWINT локализуется в ядре, специфично в центромерно-кинетохорной области хромосом, что соответствует его роли в сегрегации хромосом.
• Белок содержит спиральный (coiled coil) домен, подвергается альтернативному сплайсингу, и его 3D-структура частично определена (ключевые слова UniProt).
• Как ключевой компонент кинетохоры, ZWINT вовлечен в регуляцию клеточного цикла, митоз и биологию хромосом, что подтверждается его идентификацией в протеомных исследованиях.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является рекомбинантный фьюжн-белок, покрывающий аминокислоты 1–277 человеческого ZWINT (NP_008988.2), что соответствует N-концевой области, включающей функциональные домены. Рекомендуется использовать это антитело для детекции полноразмерных и альтернативно сплайсированных изоформ.
• Для вестерн-блоттинга предсказанная молекулярная масса составляет около 31 кДа. Включайте соответствующие позитивные контрольные лизаты из митотических клеток или тканей, экспрессирующих ZWINT, и валидируйте размер полосы в вашей экспериментальной системе.
• При иммунофлуоресценции/ИЦХ ожидайте точечное окрашивание кинетохор в прометафазе и метафазе в делящихся клетках. Используйте контрастное окрашивание ДНК для визуализации хромосом и подтверждения локализации.
• Для ИФА оптимизируйте концентрации иммобилизованного антигена и антитела, используя в качестве стандарта рекомбинантный белок ZWINT или клеточные лизаты.
• Заявлена перекрестная реактивность с белками человека, мыши и крысы; однако рекомендуется валидировать в конкретном виде и экспериментальном контексте для обеспечения специфичности.

CamelBio: Ваш мост к единому источнику поставок

CamelBio предлагает производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям оптимизированную цепочку поставок сырья для ИФА из одного источника, с фокусом на мишени клеточного цикла и биологии хромосом. Наш ассортимент включает валидированные поликлональные антитела против ZWINT, рекомбинантные антигены и вспомогательные реагенты, дополненные техническим консультированием для ускорения разработки ваших аналитических систем от концепции до клиники.