Моноклональное антитело Anti-YTHDF2 (валидировано на нокауте) для Вестерн-блоттинга, ИП, ИФ/ИЦХ, ИФА - Q9Y5A9

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация YTHDF2

• YTHDF2 специфически связывается с РНК, содержащими N6-метиладенозин (m6A), и регулирует их стабильность, способствуя деградации через взаимодействия с CCR4-NOT деаденилазным комплексом и рибонуклеазным комплексом P/MRP. Связанные ссылки: PMID:24284625 PMID:26046440 PMID:26318451 PMID:27558897
• Паралоги YTHDF (YTHDF1, YTHDF2 и YTHDF3) имеют общие мишени — мРНК, содержащие m6A, и действуют избыточно, опосредуя деградацию мРНК и клеточную дифференцировку. Связанные ссылки: PMID:28106072 PMID:32492408
• На субклеточном уровне YTHDF2 локализуется в цитозоле, P-тельцах, стрессовых гранулах и может транслоцироваться в ядро при определенных условиях.
• YTHDF2 способствует образованию мембранных органелл, разделенных фазой, таких как P-тела и стрессовые гранулы, путем разделения жидкость-жидкость при связывании с мРНК, содержащими множественные остатки m6A. Связанные ссылки: PMID:31292544 PMID:31388144 PMID:31642031
• Необходим для спецификации гемопоэтических стволовых клеток, способствуя деградации мРНК, содержащих m6A. Связанные ссылки: PMID:30065315
• YTHDF2 регулирует нейральное развитие, ингибируя нейральную спецификацию через m6A-зависимую деградацию нейроспецифичных мРНК. Связанные ссылки: PMID:32169943
• Регулирует врожденный иммунный ответ, связывая транскрипты IFNB, содержащие m6A, и способствуя их деградации, тем самым ингибируя продукцию интерферона I типа. Связанные ссылки: PMID:30559377
• Во время вирусной инфекции YTHDF2 связывается с модифицированными m6A вирусными РНК, способствуя экспрессии вирусных генов и репликации, что наблюдалось для SV40 и герпесвируса, ассоциированного с саркомой Капоши (KSHV). Связанные ссылки: PMID:29447282 PMID:29659627

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (аминокислоты 339–565) включает YTH-домен, критический для распознавания m6A; для Вестерн-блоттинга рассмотрите возможность использования нокаутных клеточных линий для подтверждения специфичности полосы, так как это антитело было валидировано на нокауте.
• Для иммунопреципитации (ИП) антитело может быть подходящим для обогащения эндогенных комплексов YTHDF2–РНК; включите соответствующие негативные контроли (например, IgG) для оценки фона.
• При иммунофлуоресценции/ИЦХ YTHDF2 обычно обнаруживается в цитоплазматических фокусах (P-телах и стрессовых гранулах) и может перемещаться в ядро; оптимизируйте условия фиксации/пермеабилизации для вашего типа клеток и обработки (например, арсенит-индуцированные стрессовые гранулы).
• Для ИФА можно использовать стандартные протоколы непрямого ИФА с рекомбинантным YTHDF2 или клеточными лизатами; проведите валидацию в соответствующей матрице образца.

CamelBio: Ваш мост для закупок "все в одном"

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским институтам оптимизированный, единый канал для закупки высококачественных сырьевых материалов для ИВД. Для таких мишеней, как YTHDF2, участвующих в путях эпитранскриптомики и модификации РНК, мы предлагаем валидированные антитела, вспомогательные реагенты и услуги по индивидуальным закупкам, чтобы ускорить разработку вашего анализа от концепции до клиники.