Кроличья поликлональная антитела против WNK3 для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, ELISA - Q9BYP7

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация WNK3

• WNK3 (Протеинкиназа, дефицитная по лизину 3) — это серин/треонин-протеинкиназа, кодируемая геном WNK3 (также известным как KIAA1566, PRKWNK3), принадлежащая к семейству киназ WNK.
• Является ключевым компонентом киназного каскада WNK3-SPAK/OSR1, который регулирует электролитный гомеостаз и восстановление объема клеток при гиперосмотическом стрессе. Связанные ссылки: PMID:16275911, PMID:16275913, PMID:16501604
• При уменьшении объема клетки WNK3 действует как сенсор молекулярной скученности и подвергается жидкостно-жидкостному фазовому разделению с образованием безмембранных конденсатов, концентрирующих его субстраты. Связанные ссылки: PMID:36318922
• Внутри этих конденсатов WNK3 фосфорилирует и активирует нижестоящие киназы OXSR1/OSR1 и STK39/SPAK, которые, в свою очередь, модулируют ионные котранспортеры (NKCC, NCC и KCC), контролируя приток/отток ионов. Связанные ссылки: PMID:22989884, PMID:16275911, PMID:16275913, PMID:16357011
• WNK3 локализуется в цитоплазме и демонстрирует тканеспецифичную экспрессию с высоким уровнем в мозге, легких, почках, печени и поджелудочной железе, а также различные изоформы в мозге (изоформа 1) и почках (изоформа 3).
• Помимо киназной активности, WNK3 служит каркасным белком, который негативно регулирует мембранную локализацию транспортеров, таких как KCNJ1 и SLC26A9, и усиливает приток кальция через TRPV5/TRPV6. Связанные ссылки: PMID:16357011, PMID:17673510, PMID:18768590

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 500–600 белка WNK3 человека, предоставляя целевой регион для генерации антител; рекомендуется проверить специфичность с использованием контролей нокаута или нокдауна.
• Для Вестерн-блоттинга учтите, что предсказанная молекулярная масса WNK3 составляет ~198 кДа; оптимизируйте условия переноса для высокомолекулярных белков (например, снизьте концентрацию метанола в буфере для переноса, увеличьте время переноса).
• В экспериментах по иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии валидируйте протоколы фиксации и пермеабилизации, так как WNK3 является цитоплазматическим белком; включайте соответствующие контроли для подтверждения субклеточной локализации.
• Для применения в ELISA оцените эффективность антител как в роли захватывающего, так и детектирующего реагента; перекрестная реактивность с WNK3 мыши и крысы предполагает консервативные эпитопы, но всегда проверяйте в соответствующем видовом контексте.

CamelBio: Ваш универсальный мост для поиска реагентов

CamelBio — это универсальный поставщик сырья для ИВД, поддерживающий производителей диагностических систем и исследовательские лаборатории от концепции до клиники. Наши кроличьи поликлональные антитела к WNK3 помогают в изучении электролитного баланса и регуляции объема клеток. Мы поставляем валидированные пары антител, моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах, а также осуществляем поиск редких мишеней, чтобы оптимизировать разработку ваших анализов.