Моноклональное антитело против WNK1 для Вестерн-блоттинга - Q9H4A3

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация WNK1

• WNK1 (Серин/треонин-протеинкиназа WNK1) является ключевой киназой каскада WNK1-SPAK/OSR1, который играет критическую роль в регуляции артериального давления и объема клетки; она способствует регуляторному увеличению объема, воспринимая гиперосмотический стресс и активируя пути притока ионов. Связанные ссылки: PMID:15883153, PMID:17190791, PMID:31656913
• В условиях гиперосмотического стресса WNK1 функционирует как сенсор молекулярной скученности, претерпевая жидкостно-жидкостное фазовое разделение с образованием безмембранных компартментов, которые концентрируют WNK1 вместе с ее субстратами OXSR1/OSR1 и STK39/SPAK, усиливая киназную сигнализацию. Связанные ссылки: PMID:36318922
• На нижестоящем уровне WNK1 фосфорилирует и активирует OXSR1/OSR1 и STK39/SPAK, которые, в свою очередь, фосфорилируют ионные котранспортеры (SLC12A1/NKCC2, SLC12A2/NKCC1, SLC12A5/KCC2, SLC12A6/KCC3), регулируя транспорт натрия, калия и хлоридов и, тем самым, контролируя объем клетки и артериальное давление. Связанные ссылки: PMID:16263722, PMID:21321328, PMID:19665974
• Помимо ионного транспорта, WNK1 регулирует ангиогенез через OXSR1/OSR1 и STK39/SPAK в эндотелиальных клетках, модулирует экспорт мРНК, фосфорилируя PCF11, негативно регулирует аутофагию и необходим для стадии абсциссии во время митоза. Связанные ссылки: PMID:25362046, PMID:29196535, PMID:27911840, PMID:21220314
• WNK1 также действует как белок-скаффолд независимо от своей киназной активности: он стабилизирует компонент ER membrane protein complex EMC2 и способствует активации SGK1, рекрутируя его в mTORC2 хлорид-зависимым образом. Связанные ссылки: PMID:33964204, PMID:36373794
• Почечно-специфичная, кинозодефектная изоформа WNK1 функционирует как доминантно-негативный регулятор полноразмерной киназы, играя ключевую роль в почечном балансе натрия и калия. Связанные ссылки: PMID:14645531
• На субклеточном уровне WNK1 локализуется в цитоплазме, ядре и митотическом веретене, что соответствует ее ролям в сигналинге, экспрессии генов и клеточном делении.
• WNK1 экспрессируется широко, с наибольшим уровнем в семенниках, сердце, почках и скелетных мышцах; сильная экспрессия также наблюдается в дорсальных корешковых ганглиях и спинном мозге. Почечно-специфичная изоформа обнаруживается только в дистальных извитых канальцах и связующих канальцах нефрона.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический пептид, соответствующий аминокислотам 1-100 человеческого WNK1. Эта N-концевая область может быть консервативной; перекрестная реактивность с мышиным белком подтверждена. Проведите валидацию антитела в вашей конкретной модельной системе.
• Для Вестерн-блоттинга обратите внимание на большую молекулярную массу (~251 кДа). Используйте гель SDS-PAGE с низким процентом полиакриламида (например, 6-8%) и увеличенное время переноса (например, на ночь при 30 В), чтобы обеспечить эффективный перенос высокомолекулярных белков.
• Для применения в ИФА рассмотрите возможность использования пептида-иммуногена в качестве положительного контроля для оценки связывания антитела и установления условий анализа.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio сотрудничает с производителями диагностических систем и исследовательскими лабораториями, поставляя валидированные исходные материалы, включая премиальные моноклональные антитела, такие как этот клон против WNK1. Для анализов, нацеленных на связанную с WNK1 гипертензию, нарушения ионного транспорта или неврологические состояния, мы предоставляем единый доступ к оптимизированным парам антител, объемным вспомогательным реагентам и индивидуальному поиску исходных материалов для редких мишеней.