Кроличья поликлональная антитело против WIPI1 для WB, ELISA - Q5MNZ9

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация WIPI1

• Идентификация белка и семейство: WIPI1 (WD-повторный домен фосфоинозитид-связывающего белка 1), также известный как гомолог белка Atg18 или WIPI массой 49 кДа, относится к семейству WIPI белков WD40, которые взаимодействуют с фосфоинозитидами. Эти повторы необходимы для связывания липидов и выполнения аутофаговых функций.
• Основная функция в аутофагии: WIPI1 является ключевым компонентом механизма аутофагии, отвечающим за формирование аутофагосом, которые доставляют цитоплазматический груз к лизосомам для деградации. Он связывает фосфатидилинозитол-3-фосфат (PtdIns3P) и рекрутируется на эндоплазматическую сеть для иницииации сборки фагосфоры (PubMed:15602573, PubMed:20114074, PubMed:20484055). Связанные публикации:
  • PMID:15602573
  • PMID:20114074
  • PMID:20484055
• Позиционирование в сигнальном пути: Действуя ниже по течению от ULK1 и PI3-киназ, WIPI1 распознает PtdIns3P, образованный на мембранах эндоплазматической сети. Затем он помогает WIPI2 рекрутировать комплекс ATG12-ATG5-ATG16L1, который напрямую стимулирует удлинение новообразованной аутофагосомной мембраны. Эта функция критически важна как для индуцированной голоданием, так и для кальций-индуцированной аутофагии, а также для митoфагии (PubMed:28561066). Связанные публикации:
  • PMID:28561066
• Перенос липидов и формирование комплексов: Вместе с WDR45/WIPI4 WIPI1 усиливает ассоциацию белков ATG2 (ATG2A или ATG2B) с обогащенными PI3P мембранами, тем самым стимулируя перенос липидов для расширения аутофагосомы (PubMed:31271352). Связанные публикации:
  • PMID:31271352
• Ксеногагия и антимикробная защита: WIPI1 участвует в селективной аутофагии патогенов, например Staphylococcus aureus, поглощая бактерии в WIPI1-положительные аутофагосомоподобные везикулы, предназначенные для деградации в лизосомах (PubMed:22829830). Связанные публикации:
  • PMID:22829830
• Неаутофаговые функции: Помимо канонической аутофагии, WIPI1 регулирует созревание меланосом и транскрипцию меланогенных ферментов — процесс, не зависящий от путей, индуцированных голоданием (PubMed:21317285). Он также может участвовать в трафике маннозо-6-фосфатного рецептора (PubMed:15020712). Связанные публикации:
  • PMID:21317285
  • PMID:15020712
• Тканевое распределение и субклеточная локализация: WIPI1 экспрессируется во всех тканях, при этом самые высокие уровни наблюдаются в скелетной мышце, сердце, яичках, поджелудочной железе и плаценте; во многих опухолевых клеточных линиях его экспрессия повышена. WIPI1 локализуется в транс-Гольджинской сети, эндосомах, клатрин-покрытых везикулах и преаутофаговых структурах, а также ассоциируется с цитоскелетом.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Дизайн иммуногена: Иммуноген покрывает аминокислоты 187–446 человеческого WIPI1 — регион, содержащий несколько повторов WD40. Эта центральная часть консервативна у разных видов, что объясняет наблюдаемую перекрестную реактивность с мышью и крысой.
• Вестерн-блоттинг (WB): Учитывая высокую экспрессию WIPI1 в мышце, сердце и яичках, лизаты этих тканей подходят в качестве положительного контроля. Предсказанная молекулярная масса составляет ~49 кДа, но могут появляться дополнительные полосы из-за альтернативного сплайсинга или посттрансляционных модификаций. Рекомендуется включить этап блокировки и проверить специфичность с использованием сиРНК или нокаутных контрольных образцов.
• Применение в ИФА: Данное антитело можно использовать в формате непрямого ИФА. Для разработки сэндвич-ИФА рассмотрите возможность сочетания с моноклональным захватным антителом, специфичным к неперекрывающемуся эпитопу. Валидацию проводите с рекомбинантным белком WIPI1 (например, тем же иммуногеном) или лизатами клеток с высоким уровнем экспрессии.
• Перекрестная реактивность и видовая консистентность: Указанная перекрестная реактивность с человеческим, мышиным и крысиным белком означает, что распознаваемые эпитопы консервативны. Тем не менее рекомендуется провести пилотный Вестерн-блоттинг с лизатами всех трех видов для подтверждения реактивности и картины полос.

CamelBio: ваш единый мост для поставок реагентов

CamelBio стремится поддержать производителей диагностических систем и исследователей полным портфелем сырьевых материалов для ИВД: от валидированных пар антител до вспомогательных реагентов. Наша поликлональная антитело против WIPI1 подходит для исследований аутофагии и разработки анализов, мы также предлагаем дополнительные услуги — производство заказных моноклональных антител и поставку реагентов большими партиями, чтобы оптимизировать вашу работу. Независимо от того, нужна ли вам стабильная воспроизводимость от партии к партии или помощь в масштабировании производства, CamelBio создает мост между вашей идеей и клиническим применением.