Кроличья поликлональная антитела против VPS4A для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИКЦ, ИФА - Q9UN37

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация VPS4A

• Вакуолярный белок, ассоциированный с сортировкой, 4A (VPS4A) — это АТФаза семейства AAA, которая использует гидролиз АТФ для разборки комплексов ESCRT-III, что необходимо для событий мембранного деления в эндосомальном пути.
• Требуется для образования мультивезикулярных телец (MVB) и сортировки интралюминальных везикул (ILV); VPS4A перераспределяет компоненты ESCRT-III в цитоплазму для повторного использования, регулируя размер эндосом, организацию первичной реснички и запечатывание ядерной оболочки во время анафазы (PubMed:33186545). Связанные ссылки: PMID:33186545
• Играет центральную роль на этапе абсциссии цитокинеза; удерживается в средней части тела (микрободи) белками ZFYVE19/ANCHR и CHMP4C до завершения контрольной точки, после чего высвобождение VPS4A запускает деление мембраны (PubMed:24814515). Связанные ссылки: PMID:24814515
• Опосредует экзосомальный релиз SDCBP, CD63 и синдecана, связывая аппарат ESCRT с биогенезом экзосом (PubMed:22660413). Связанные ссылки: PMID:22660413
• Критически важен для нормального цитокинеза эритробластов и эритропоэза; мутации связаны с врожденной дизэритропоэтической анемией (PubMed:33186543). Связанные ссылки: PMID:33186543
• Вместе с аппаратом ESCRT, VPS4A участвует в топологически сходных событиях мембранного деления, которые используются оболочечными вирусами (например, ВИЧ-1) для почкования.
• Субклеточно локализуется на мембранах поздних эндосом, в средней части тела (микрободи), цитоплазме и митотическом веретене.
• Убиквитарно экспрессируется; связан с вариантами заболеваний, включая катаракту, наследственную гемолитическую анемию и умственную отсталость (как указано в ключевых словах UniProt).

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует остаткам 1-120 белка VPS4A человека, N-концевой области; это может способствовать перекрестной реактивности с ортологами мыши и крысы.
• Как поликлональные антитела, они обычно обеспечивают надежное детектирование в денатурирующих (Вестерн-блоттинг) и нативных (ИГХ-П, ИФ/ИКЦ) методах; однако оптимальные рабочие разведения следует определять эмпирически для каждого анализа.
• Для Вестерн-блоттинга ожидаемая полоса составляет приблизительно 49 кДа; используйте лизаты целых клеток или тканей, экспрессирующие VPS4A.
• Для ИГХ-П и ИФ/ИКЦ валидируйте специфичность с помощью соответствующих положительных и отрицательных контролей и оптимизируйте условия демаскировки антигена или пермеабилизации.
• В ИФА рассмотрите возможность использования этих антител в паре с другими антителами против VPS4A для создания сэндвич-анализа после валидации.
• Поскольку VPS4A локализуется в средней части тела во время цитокинеза, синхронизация клеток на поздней стадии митоза или обогащение препаратов микрободи-структурами могут улучшить детекцию при ИФ/ИКЦ.
• Ввиду убиквитарной экспрессии VPS4A, проверяйте эффективность нокдауна или нокаута в экспериментах с РНК-интерференцией/CRISPR для подтверждения специфичности.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, исследовательским лабораториям и академическим институтам комплексные поставки сырья для ИВД, техническую поддержку и консультационные услуги «под ключ» — от концепции до клиники. Эти поликлональные антитела против VPS4A поддерживают исследования в области эндосомальной сортировки, клеточного деления и вирусного патогенеза. Для закупки реагентов оптом, валидированных пар антител или разработки антител на заказ CamelBio предлагает упрощенный доступ как к редким, так и к рутинным мишеням.