Моноклональное антитело против Винкулина для WB, IF-P, ELISA - P18206

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация Винкулина

• Винкулин — это высококонсервативный актин-связывающий белок, который связывает интегрины и кадгерины с актиновым цитоскелетом, играя ключевую роль как в адгезии клетка-матрикс, так и в адгезии клетка-клетка.
• Специфичная для мышц изоформа, известная как метавинкулин (MV), возникает в результате альтернативного сплайсинга и содержит дополнительный экзон; она преимущественно экспрессируется в сердечной и скелетных мышцах.
• Винкулин локализуется в фокальных контактах клетка-матрикс, адгезионных соединениях клетка-клетка и перинуклеарной области, а также в специализированных структурах, таких как подосомы и сарколемма.
• Белок подвергается множественным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, ацетилирование и пальмитоилирование, которые регулируют его активацию, взаимодействие с белками и таргетинг на мембрану.
• Винкулин действует как механосенсор; индуцированные натяжением конформационные изменения открывают криптические сайты связывания для талина и F-актина, тем самым усиливая адгезивные комплексы.
• Являясь ключевым компонентом комплекса кадгерин-катенин, винкулин модулирует поверхностную экспрессию E-кадгерина и потенцирует механосенсорику в адгезионных соединениях, влияя на морфогенез тканей и гомеостаз.
• В соответствии с его важными ролями в адгезии и механотрансдукции, мутации в гене VCL связаны с дилатационной кардиомиопатией (CMD1W) и гипертрофической кардиомиопатией (CMH15).
• Кроме того, винкулин участвует в морфологии клеток, миграции и инвазии, что подтверждается его рекрутированием в подосомы и влиянием на динамику ламеллиподий.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический пептид, соответствующий C-концевой области (а.а. 800-900) винкулина человека; эта область консервативна у человека, мыши и крысы, что объясняет заявленную перекрестную реактивность.
• При вестерн-блоттинге винкулин мигрирует с кажущейся молекулярной массой ~124 кДа; используйте соответствующие процентные соотношения гелей (например, 8% SDS-PAGE) и проверяйте эффективность переноса с помощью окрашивания общего белка.
• В иммунной флуоресценции (IF-P) учитывайте условия фиксации и пермеабилизации, сохраняющие архитектуру фокальных контактов и адгезионных соединений (например, 4% PFA с последующей обработкой 0,1% Triton X-100). Ко-окрашивание маркерами паксиллина или F-актина может подтвердить локализацию.
• При выполнении ELISA титруйте антитело против иммуногенного пептида и нативного белка для определения оптимальных концентраций; перекрестную адсорбцию можно оценить, если в сложных матрицах наблюдается высокий фон.
• Поскольку винкулин является убиквитарным белком, включение соответствующих контролей загрузки (например, GAPDH, β-актин) необходимо для количественного анализа.
• Для исследований с участием мышечных тканей обратите внимание, что антитело может распознавать как изоформу винкулина, так и метавинкулина; последняя мигрирует немного выше, примерно при 150 кДа.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio предлагает комплексное универсальное решение для реагентов IVD, связывая производителей диагностических средств и исследовательские лаборатории с более чем 200 000 продуктов. Для исследователей, занимающихся изучением клеточной адгезии, механобиологии и нарушений цитоскелета, мы поставляем валидированные моноклональные антитела, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты для ускорения вашей работы. Используйте наш опыт в индивидуальном поиске и оптовых поставках для удовлетворения требований вашего конкретного проекта.