Моноклональное антитело против VCAM-1/CD106 для проточной цитометрии – P29533

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация VCAM-1/CD106

• VCAM-1 (сосудистая молекула адгезии клеток 1), также известный как CD106, представляет собой клеточную адгезивную гликопротеин, кодируемую геном Vcam1. Он преимущественно экспрессируется на поверхности эндотелиальных клеток и играет важнейшую роль в иммунном надзоре и воспалении.
• Как основной регулятор адгезии лейкоцитов к эндотелию, VCAM-1 опосредует прочную адгезию лимфоцитов, моноцитов, эозинофилов и базофилов к сосудистому эндотелию через взаимодействие с интегринами (например, VLA-4/α4β1).
• Во время воспалительных ответов связывание VCAM-1 с интегринами лейкоцитов запускает внутриклеточные сигнальные каскады, включая активацию кальциевых каналов и малой ГТФазы RAC1, что способствует трансэндотелиальной миграции иммунных клеток.
• VCAM-1 также выступает в качестве контрольной точки качества для попадания в костный мозг, предоставляя сигнал «не ешь меня» в контексте презентации MHC класса I, предотвращая фагоцитоз жизнеспособных гемопоэтических клеток.
• Белок существует в нескольких изоформах за счет альтернативного сплайсинга; каноническая форма представляет собой трансмембранный белок массой примерно 81 кДа, хотя растворимая форма 38 кДа может образовываться в результате отщепления или альтернативного сплайсинга.
• Субклеточно VCAM-1 локализован на клеточной мембране и может высвобождаться в секретируемой форме; он высоко экспрессируется на воспаленном сосудистом эндотелии, а также на клетках типа макрофагов и дендритных клеток как в нормальных, так и в воспаленных тканях, и в костном мозге.
• Посттрансляционные модификации включают гликозилирование, образование дисульфидных связей и убиквитинирование; белок содержит иммуноглобулиноподобные домены и трансмембранную спираль, что относит его к надсемейству иммуноглобулинов.
• В физиологических условиях экспрессия VCAM-1 индуцируется цитокинами, такими как TNF-α и IL-1, а его повышенная регуляция является отличительной чертой воспалительных заболеваний, что делает его ценной мишенью для диагностических и терапевтических исследований.

Экспериментальное руководство и технические рекомендации

• Иммуноген соответствует N-концевому внеклеточному региону (аминокислоты 25-310), который включает первый иммуноглобулиноподобный домен, участвующий в связывании с интегринами; такая конструкция способствует распознаванию нативного внеклеточного эпитопа на живых клетках, что подходит для проточной цитометрии без пермеабилизации.
• – это яркий красный флуоресцентный краситель; при разработке многокрасочных панелей избегайте спектрального перекрытия с PE, Texas Red и аналогичными флуорофорами. Рекомендуется использовать соответствующие компенсационные контроли.
• Для проточной цитометрии титруйте антитело для определения оптимальной концентрации для специфического окрашивания на мышиных клеточных линиях или первичных клетках, экспрессирующих VCAM-1, например, обработанных TNF-α эндотелиальных клетках bEnd.3 или макрофагах, полученных из костного мозга.
• Рекомендуется использовать краситель жизнеспособности для исключения мертвых клеток, так как поврежденные клетки могут проявлять неспецифическое связывание. Включите изотипный контроль или Fc-блокировку для минимизации фона.
• Перекрестная реактивность подтверждена для мыши; эффективность на других видах не гарантируется. При использовании в тканях проводите валидацию с соответствующими положительными и отрицательными контроля.

CamelBio: ваш универсальный мост по поставкам реагентов

CamelBio поддерживает производителей диагностики и исследовательские лаборатории, предоставляя полный спектр услуг по поставке сырья для ИВД (in vitro диагностики) и технической поддержки. Для разработки иммуноанализов, связанных с VCAM-1, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные антитела, такие как этот клон против VCAM-1, и крупные объемы вспомогательных реагентов для оптимизации ваших рабочих процессов. От концепции до клиники доверьтесь CamelBio как вашему преданному партнеру по получению высококачественных, стабильных сырьевых материалов.