Кроличья поликлональная антитело против UBE2C для WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA — O00762

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация UBE2C

• UBE2C (UBCH10) относится к семейству убиквитин-конъюгирующих ферментов (E2), отвечает за перенос убиквитина от фермента E1 и катализ его передачи на субстраты.
• Этот белок является незаменимым кофактором комплекса стимуляции анафазы/циклоcомы (APC/C) — важной убиквитин-лигазы E3, которая регулирует протекание митоза через нацеливание ключевых субстратов на протеасомную деградацию.
• UBE2C в основном катализирует образование полиубиквитиновых цепей, связанных по Lyz-11 — это неканоническое соединение имеет ключевое значение для распознавания субстрата APC/C и его последующей деградации.
• Помимо цепей по Lys-11, UBE2C может опосредовать полиубиквитинирование по Lys-48 в условиях in vitro, что подтверждает его универсальность в формировании убиквитиновых цепей.
• Альтернативный сплайсинг гена UBE2C может приводить к образованию нескольких вариантов транскрипта, что потенциально приводит к появлению изоформ с различными регуляторными свойствами.
• Согласно данным UniProt, активность UBE2C регулируется посттрансляционными модификациями, включая фосфорилирование и ацетилирование, что указывает на динамическую регуляцию активности UBE2C во время клеточного цикла.
• Белок высоко консервативен у разных видов, что обеспечивает перекрестную реактивность с ортологами мыши и крысы, что было подтверждено в ходе валидации антитела.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Полноразмерный иммуноген (aa 1–179) позволяет распознавать все изоформы UBE2C, поэтому в некоторых тканях или клеточных состояниях могут наблюдаться полосы с немного отличающейся молекулярной массой.
• Для Вестерн-блоттинга используют лизат клеток, остановленных в митозе (например, после обработки нокодазолом) в качестве положительного контроля, поскольку концентрация UBE2C достигает максимума во время митоза. Ожидается появление полосы рядом с отметкой 20 кДа.
• Для иммуногистохимии (IHC-P) и иммунофлуоресценции (IF/ICC) рекомендуется тепловая демаскировка антигена в цитратном буфере (pH 6.0) и валидация на заведомо положительных тканях, например быстро пролиферирующих опухолях или яичках.
• При иммунопреципитации (IP) поликлональное антитело позволяет обогатить препарат UBE2C и его взаимодействующими партнерами; для снижения неспецифического связывания рекомендуется предварительная очистка путем осаждения контрольным IgG.
• Для ELISA проводят оптимизацию концентрации покрывающего антигена и разведения антитела с использованием рекомбинантного белка UBE2C в качестве стандарта; учитывайте, что поликлональные антитела могут демонстрировать небольшую вариабельность между разными сериями.
• Всегда используйте релевантные контроли (например, лизат клеток с нокаутом UBE2C) для подтверждения специфичности связывания, особенно при работе с образцами, в которых экспрессия UBE2C низкая или регулируется.

CamelBio: ваш единый мост для поставок лабораторных реагентов

CamelBio предоставляет диагностическим и исследовательским лабораториям беспрепятственный доступ к высококачественным сырьевым материалам для ИВД: от моноклональных и поликлональных антител до вспомогательных реагентов и услуг по индивидуальному поиску реагентов. Данный продукт против UBE2C является примером нашей специализации на мишенях путей клеточного цикла и убиквитин-протасомной системы, мы поддерживаем разработку анализов в онкологии и клеточной биологии. Независимо от того, нужны ли вам валидированные пары антител для сэндвич-ELISA, крупные партии конъюгатов производственного качества или помощь в поиске редких мишеней, наша интегрированная цепочка поставок ускоряет реализацию вашего проекта от концепции до клинических испытаний.