Антитело к Anti-TriMethyl-Histone H3-K9 (Q16695/P68431), кроличье моноклональное для эпигенетических исследований

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация гистона H3

• Функция: Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, упаковывающим и уплотняющим ДНК в хроматин для регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации и хромосомной стабильности. Посттрансляционные модификации гистонов, известные как гистоновый код, модулируют структуру хроматина и экспрессию генов.
• Субклеточная локализация: Преимущественно локализован в ядре и связан с хромосомами на протяжении всего клеточного цикла.
• Тканевая специфичность: Вариант гистона H3 H3.1t (Q16695) специфически экспрессируется в тестикулярных клетках, в то время как канонический H3.1 (P68431) повсеместно экспрессируется в различных тканях.
• Посттрансляционные модификации: Гистон H3 подвергается множеству ковалентных модификаций, причем лизин 9 является ключевым регуляторным сайтом. Лизин 9 может подвергаться цитруллинированию (превращению аргинина в цитруллин) PMID:15345777 PMID:16567635 и симметричному диметиларгинину. Кроме того, триметилирование лизина 9 (H3K9me3) является хорошо охарактеризованной репрессивной меткой хроматина. Это антитело специфически обнаруживает гистон H3, триметилированный по лизину 9. Связанные ссылки: PMID:15345777, PMID:16567635

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Дизайн иммуногена: Антитело было получено с использованием синтетического триметилированного пептида, охватывающего лизин 9 гистона H3 человека. При использовании этого антитела рассмотрите возможность валидации его специфичности путем тестирования против немодифицированного пептида H3 или пептидов с альтернативными модификациями (например, монометил, диметил, ацетил) для подтверждения селективности к триметилированному состоянию.
• Вестерн-блоттинг (WB) и Дот-блоттинг (DB): Для WB используйте стандартные протоколы экстракции гистонов (кислотная экстракция или высокая концентрация соли) для обогащения основными белками. Обеспечьте адекватный блокинг и разведение антитела для минимизации неспецифического связывания. Для DB проверьте перекрестную реактивность с другими модификациями гистонов при необходимости.
• Иммуннофлуоресценция/Иммунноцитохимия (IF/ICC): Оптимизируйте условия пермеабилизации и фиксации для сохранения морфологии ядра и доступности антигена. Совместное окрашивание с DAPI может помочь подтвердить ядерную локализацию.
• ELISA: Используйте для высокопроизводительного скрининга; рассмотрите возможность покрытия пластин синтетическими метилированными и неметилированными пептидами для оценки специфичности.
• Иммунопреципитация хроматина (ChIP, ChIP-seq) и CUT&Tag: Это антитело подходит для обогащения хроматина с меткой H3K9me3 методом ChIP. Может использоваться ChIP с сшивкой (X-ChIP) или нативный ChIP (N-ChIP); провалидуйте с положительными и отрицательными контрольными геномными локусами (например, гетерохроматин против активных промоторов). Для CUT&Tag следуйте опубликованным протоколам для приложений с малым количеством материала или на уровне одной клетки. Провалидируйте антитело в вашей соответствующей системе образцов перед масштабными экспериментами.

CamelBio: Ваш мост для снабжения полного цикла

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и исследовательским институтам комплексный доступ к сырью для IVD, техническим услугам и консалтингу — охватывая все этапы от концепции до клиники. Для эпигенетических исследований хроматина мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, включая этот продукт против триметил-гистона H3-K9, и вспомогательные реагенты оптом. Наши компетенции в области снабжения распространяются на редкое сырье для мишеней, что позволяет разработку IVD от открытия биомаркеров до коммерческого производства.