Кроличье поликлональное антитело против TRIM32 для Вестерн-блоттинга и ИФА — Q13049

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация TRIM32

• TRIM32 (белок с трипарситным мотивом 32) представляет собой Е3 убиквитин-протеин-лигазу с молекулярной массой 72 кДа, кодируемую геном TRIM32, также известная под названиями HT2A, BBS11, TATIP, LGMD2H и LGMDR8. Она относится к семейству TRIM, для представителей которого характерны домены RING-фингер, B-box и спиральная навивка.
• В качестве Е3 убиквитин-лигазы TRIM32 опосредует как «Lys-48»-связанную, так и «Lys-63»-связанную полиубиквитинацию различных субстратов. Например, она стимулирует «Lys-63»-связанную убиквитинацию STING1, способствуя взаимодействию STING1 с TBK1 и индукции сигнального пути, приводящего к продукции интерферона-β. Связанные источники: PMID:22745133
• TRIM32 положительно регулирует аутофагию по нескольким механизмам: она формирует незаякоренные «Lys-63»-связанные полиубиквитиновые цепи, которые активируют комплекс ULK1 с AMBRA1, а при метаболическом стрессе фосфорилированная CHK2 TRIM32 убиквитинирует ATG7 по остатку лизина-45, что инициирует аутофагию. Связанные источники: PMID:31123703, PMID:37943659
• В системе врожденного иммунитета TRIM32 выполняет как положительные, так и отрицательные регуляторные функции. Она запускает аутофагную деградацию TICAM1 (TRIF) для ослабления воспалительных ответов, опосредованных TLR3/4, а при бактериальной инфекции способствует аутофагии-опосредованному удалению Mycobacterium tuberculosis из макрофагов. Связанные источники: PMID:28898289, PMID:37543647
• TRIM32 локализуется в цитоплазме, митохондриях и эндоплазматической сети и экспрессируется в селезенке, тимусе, предстательной железе, яичках, яичниках, кишечнике, толстой кишке и скелетной мускулатуре, что соответствует его роли в работе иммунной системы и мышечной ткани.
• Мутации в гене TRIM32 ассоциированы с такими заболеваниями человека, как синдром Барде–Бидля (BBS11), лопаточно-плечевая мышечная дистрофия типа 2H (LGMD2H/LGMDR8) и интеллектуальная недостаточность, что подчеркивает важность этого белка для развития и поддержания гомеостаза тканей.
• Белок подвергается посттрансляционным модификациям, таким как ацетилирование и фосфорилирование; фосфорилирование по остаткам серина, опосредованное CHK2 при метаболическом стрессе, критически важно для выполнения функции TRIM32 в регуляции аутофагии. Связанные источники: PMID:37943659
• TRIM32 первоначально был идентифицирован как белок, взаимодействующий с Tat, и может опосредовать биологическую активность Tat ВИЧ-1 in vivo, также он взаимодействует с белками Tat ВИЧ-2 и EIAV. Связанные источники: PMID:7778269

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевой области (аминокислоты 1–280) человеческого TRIM32, которая включает домены RING и B-box. Эта область относительно консервативна, поэтому антитело способно реагировать с TRIM32 мыши и крысы, как указано выше. При Вестерн-блоттинге в лизатах тканей человека, мыши или крысы (например, скелетной мышцы, мозга или селезенки) ожидается обнаружение основной полосы около 72 кДа. Для подтверждения специфичности рекомендуется использовать соответствующие положительные и отрицательные контролы.
• Для применения в ИФА поликлональная природа этого антитела может обеспечивать повышенную чувствительность при захвате или детекции. Тем не менее мы рекомендуем оптимизировать условия покрытия и детекции для вашего конкретного формата анализа, а также валидировать эффективность работы с использованием рекомбинантного белка или заведомо положительных образцов.
• Учитывая участие TRIM32 в регуляции аутофагии и иммунного сигналинга, обработка клеток специфическими стимулами (например, метаболический стресс, вирусная инфекция) может изменять уровень экспрессии или характер посттрансляционных модификаций белка, что может повлиять на результат детекции. Рекомендуем учитывать эти переменные при планировании экспериментов.

CamelBio: ваш единый мост для поставок реагентов

CamelBio — ваш универсальный партнер по закупке сырья для ИВД (in vitro диагностики), мы поддерживаем производителей диагностических систем, исследовательские лаборатории и клинических разработчиков на всех этапах от концепции до клинических испытаний. Мы предлагаем широкий портфель продуктов, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, крупные партии вспомогательных реагентов и индивидуальный поиск редких мишеней. Для проектов, связанных с TRIM32, охватывающих иммунологию, неврологию, мышечную дистрофию и диагностику редких заболеваний, наша логистическая сеть и технические консультации гарантируют, что вы получите подходящие материалы на каждом этапе работы.