Кроличья поликлональная антитела против TNFSF13B для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - Q9Y275

Основные характеристики продукта и параметры

Биологический контекст: Функция и локализация TNFSF13B

• TNFSF13B (также известный как BAFF, BLyS или TALL-1) — это цитокин, принадлежащий к суперсемейству лигандов фактора некроза опухоли (TNF), с двумя основными изоформами, образующимися в результате альтернативного сплайсинга; изоформа 1 является полноразмерной, биологически активной формой, в то время как изоформа 2 может ингибировать секрецию и функцию изоформы 1.
• Являясь ключевым регулятором гомеостаза B-клеток, TNFSF13B связывается с рецепторами TNFRSF13B (TACI) и TNFRSF17 (BCMA) и вместе с лигандом APRIL формирует путь «два лиганда — два рецептора», который стимулирует функцию B- и T-клеток и модулирует гуморальный иммунитет.
• Его взаимодействие со специфичным для BAFF рецептором BAFFR (BR3) обеспечивает критический сигнал выживания для зрелых B-клеток и контролирует количество периферических B-клеток и B-клеточный ответ.
• Помимо своей роли цитокина, TNFSF13B может действовать как транскрипционный фактор для собственного гена в комплексе с NF-κB p50, особенно при аутоиммунных и пролиферативных заболеваниях B-клеток; изоформа Delta4BAFF необходима для высвобождения растворимого BAFF моноцитами, стимулированными IFN-γ, и для выживания B-клеток.
• На субклеточном уровне TNFSF13B экспрессируется как трансмембранный белок II типа на клеточной мембране, но может быть расщеплен и секретирован в виде растворимого цитокина.
• Экспрессия в тканях высока в лейкоцитах периферической крови, особенно в моноцитах и макрофагах, а также обнаруживается в селезенке, лимфатических узлах, костном мозге, T-клетках и дендритных клетках; более низкие уровни — в плаценте, сердце, легких и фетальных тканях; изоформа 2 экспрессируется во многих миелоидных клеточных линиях.
• Посттрансляционные модификации включают N-гликозилирование и дисульфидную связь; белок содержит трансмембранный спиральный домен и консервативный TNF-гомологичный домен и классифицируется под ключевыми словами, такими как цитокин, иммунитет и секретируемый белок.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует внеклеточному домену (а.о. 90–160) человеческого TNFSF13B, который является высококонсервативным регионом у разных видов; такая конструкция объясняет наблюдаемую перекрестную реактивность с белками мыши и крысы.
• Для Вестерн-блоттинга теоретическая молекулярная масса составляет приблизительно 31 кДа; для детекции рекомендуются восстанавливающие условия, но следует учитывать, что гликозилирование может вызывать небольшое смещение вверх.
• При выполнении иммуногистохимии (ИГХ-П) методы извлечения антигена, такие как тепловая демаскировка эпитопов (HIER), могут улучшить сигнал; срез ткани миндалины или лимфатического узла человека, фиксированный формалином и залитый в парафин, является подходящим положительным контролем.
• Для непрямой иммунофлуоресценции (ИФ/ИЦХ) рассмотрите возможность пермеабилизации для детекции как мембранного, так и внутриклеточного пулов, поскольку TNFSF13B может секретироваться и может присутствовать в аппарате Гольджи.
• В применениях ИФА это антитело может использоваться в качестве захватывающего или детектирующего реагента; для сэндвич-иммуноанализов рекомендуется использовать пару с моноклональным антителом или другим поликлональным антителом против неперекрывающегося эпитопа.
• Как поликлональное антитело, оно требует проверки партионной консистенции; всегда включайте соответствующие положительные и отрицательные контроли для подтверждения специфичности в выбранной системе образцов.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio соединяет производителей диагностических систем и исследовательские лаборатории с валидированными сырьевыми материалами для ИВД и всесторонней технической поддержкой. Для проектов, сосредоточенных на биологии B-клеток и аутоиммунных заболеваниях, эти поликлональные антитела против TNFSF13B являются частью нашего обширного портфеля, который включает оптимизированные пары антител, моноклональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск редких мишеней. Наша модель «все в одном» оптимизирует ваш рабочий процесс разработки от концепции до клиники, обеспечивая надежные поставки и стабильное качество.