Кроличьи поликлональные антитела к Anti-TNF-α для WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P01375

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация TNF-α

• TNF-α — это гомотримерный цитокин, который существует в виде трансмембранного предшественника типа II массой 26 кДа и растворимой формы массой 17 кДа, образующейся в результате протеолитического расщепления. Его структура включает внутриклеточный домен, единую трансмембранную спираль и внеклеточный C‑концевой домен, связывающий рецептор.
• Кодируемый геном TNF (псевдонимы TNFA, TNFSF2) на 6-й хромосоме человека, TNF‑α является типичным членом суперсемейства фактора некроза опухоли, которое состоит из 19 лигандов, регулирующих разнообразные биологические процессы.
• TNF‑α в основном передает сигнал через два рецептора: TNFRSF1A/TNFR1 и TNFRSF1B/TNFBR. Он в основном секретируется активированными макрофагами и оказывает плеиотропные эффекты, включая индукцию апоптоза в определенных линиях опухолевых клеток, лихорадку (пирогенность) и кахексию.
• При ревматоидном артрите TNF‑α нарушает функцию регуляторных T‑клеток, повышая активность протеинфосфатазы 1 (PP1), которая дефосфорилирует ключевой остаток Ser‑418 в белке FOXP3, что приводит к функциональной недостаточности Treg. Связанные ссылки: PMID:23396208
• TNF‑α выступает в качестве ключевого медиатора гибели клеток в противораковом действии нейтрофилов, стимулированных БЦЖ (BCG), в сочетании с миметиком DIABLO/SMAC, что было продемонстрировано на линии раковых клеток мочевого пузыря RT4v6. Связанные ссылки: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• Синергически с IL‑1B и IL‑6, TNF‑α индуцирует выработку VEGF, тем самым способствуя ангиогенезу. Связанные ссылки: PMID:12794819
• Субклеточная локализация является динамичной: полноразмерный белок находится на клеточной мембране, тогда как отщепленный эктодомен секретируется. Внутриклеточный домен (ICD) может транслокироваться в ядро и стимулировать выработку IL‑12 в дендритных клетках.
• Посттрансляционные модификации включают гликозилирование, миристоилирование, фосфорилирование и образование дисульфидных связей, все из которых имеют решающее значение для правильного сворачивания, активности и стабильности.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует C‑концевой области (а.о. 134–233) человеческого TNF-α, которая находится в зрелой секретируемой части. Полученные поликлональные антитела могут распознавать как мембраносвязанную, так и растворимую формы цитокина.
• При вестерн-блоттинге полоса примерно при 26 кДа представляет собой полноразмерный трансмембранный предшественник, а полоса при ~17 кДа указывает на отщепленную растворимую форму. Используйте лизаты макрофагов или моноцитов, стимулированных LPS, в качестве положительного контроля.
• При иммуногистохимии для парафиновых срезов может потребоваться тепловой retrieving антигена. Рекомендуется протестировать ткани, богатые TNF‑α, такие как воспаленные лимфатические узлы или синовиальная оболочка при ревматоидном артрите.
• При использовании иммунофлуоресценции или ELISA проверьте специфичность антител с помощью рекомбинантного TNF‑α или соответствующих положительных/отрицательных клеточных линий, экспрессирующих мишень.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и исследовательским институтам комплексный доступ к сырью для IVD, техническим услугам и консалтингу — охватывая все этапы от концепции до клиники. Эти кроличьи поликлональные антитела к TNF‑α являются универсальным инструментом для разработки иммуноанализов в исследованиях воспаления, онкологии и аутоиммунных заболеваний. Помимо антител, CamelBio поставляет валидированные пары антигенов, вспомогательные реактивы оптом и поиск сырья для редких мишеней, позволяя вам ускорить создание ваших диагностических тестов с помощью надежных высококачественных критических реагентов.