Поликлональное антитело к THOC4/ALYREF для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - Q86V81

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация THOC4/ALYREF

• THOC4/ALYREF, также известный как субъединица 4 комплекса THO, является ключевым компонентом комплекса TREX (транскрипция/экспорт) и функционирует как адаптер экспорта мРНК, связывая транскрипцию с процессингом мРНК и ядерным экспортом сплайсированных мРНК. Связанные ссылки: PMID:15833825 PMID:15998806 PMID:17190602

• Специфически связывается со сплайсированной мРНК и рекрутируется кап- и сплайсинг-зависимым образом вблизи 5'-конца, взаимодействуя с кап-связывающим белком NCBP1 для сборки комплекса TREX. Связанные ссылки: PMID:15833825 PMID:15998806 PMID:17190602

• Опосредует ядерный экспорт безъинтронных мРНК, рекрутируясь через АТФ-связанный DDX39B; этот путь необходим для экспорта вирусных безъинтронных мРНК, таких как мРНК герпесвируса, ассоциированного с саркомой Капоши (KSHV). Связанные ссылки: PMID:17984224

• Выступает в роли связующего адаптера между комплексом экзонного соединения (EJC) и ядром TREX, облегчая передачу мРНК экспортному рецептору NXF1-NXT1 для транслокации через ядерную пору. Связанные ссылки: PMID:37020021 PMID:11675789 PMID:11707413 PMID:11979277

• Взаимодействует с THOC5, усиливая РНК-связывающую активность NXF1, и необходим для его локализации на ядерной оболочке, тем самым обеспечивая ядерный экспорт специфических мРНК, таких как HSP70. Связанные ссылки: PMID:19165146

• Распознает мРНК, модифицированные по 5-метилцитозину (m5C), и опосредует их ядерно-цитоплазматический челночный транспорт, добавляя уровень эпитранскриптомной регуляции к экспорту мРНК. Связанные ссылки: PMID:28418038

• Функционирует как молекулярный шаперон, способствующий димеризации транскрипционных факторов с основным лейциновым застежкой (bZIP), тем самым усиливая транскрипционную активацию. Связанные ссылки: PMID:10488337

• Субклеточная локализация: ядро, ядерные спеклы и цитоплазма; посттрансляционные модификации включают ацетилирование, цитруллинирование и фосфорилирование. Экспрессируется во многих типах рака, а также участвует в элонгации транскрипции и стабильности генома. Связанные ссылки: PMID:12438613

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический пептид, соответствующий N-концевой области (а.о. 1–100) белка THOC4/ALYREF человека. Проверьте консервативность последовательности у мыши и крысы (идентификаторы UniProt: Q8VE80, Q6AYK3), чтобы убедиться в ожидаемой перекрестной реактивности на основе идентичности аминокислот.
• Для Вестерн-блоттинга ожидайте полосу около 27 кДа. Используйте лизаты клеток HeLa, HEK293 или других клеток, экспрессирующих THOC4, в качестве положительного контроля; образцы с нокдауном или нокаутом siRNA могут служить отрицательным контролем.
• При иммуногистохимии (ИГХ-П) и иммунофлуоресценции (ИФ/ИЦХ) оптимизируйте демаскирование антигена (например, термоиндуцированное в цитратном буфере) и пермеабилизацию. THOC4/ALYREF дает ядерное и нуклеоплазматическое окрашивание; используйте двойное окрашивание с ядерными маркерами для подтверждения локализации.
• Для ИФА иммобилизируйте на планшете иммунизирующий пептид или рекомбинантный белок THOC4/ALYREF. Проведите титрование антитела в диапазоне от 1:500 до 1:32 000 и детектируйте с помощью соответствующего вторичного антитела.
• Всегда проверяйте работу антитела в соответствующей системе образцов и применении; рекомендуемые литературные контроли можно найти в указанных публикациях.

CamelBio: Ваш мост к комплексным решениям

CamelBio упрощает ваш путь от концепции до клиники, предлагая комплексный портфель сырья для ИВД, технических услуг и консалтинга. Для исследований экспорта мРНК, транскрипции и биологии рака мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и сырье для редких мишеней. Сотрудничайте с CamelBio, чтобы ускорить разработку анализов с помощью надежных, высококачественных реагентов, поддерживаемых комплексной поддержкой на всех этапах.