Антитело кролика поликлональное против рецептора II TGF-бета (TGFBR2) для WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P37173

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация рецептора типа 2 TGF-бета

• Идентичность и структура рецептора: Рецептор типа 2 TGF-бета (TGFBR2) — это однопроходный трансмембранный рецептор I типа с серин/треонинкиназной активностью, который служит высокоаффинным рецептором для цитокинов TGF-бета TGFB1, TGFB2 и TGFB3. Он кодируется геном TGFBR2 на 3-й хромосоме человека; альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ, некоторые из которых связаны с наследственным неполипозным колоректальным раком, аневризмой аорты и краниосиностозом.
• Канонический SMAD-зависимый сигналинг: При связывании лиганда TGFBR2 объединяется с двумя рецепторами I типа (TGFBR1) с образованием гетеротетрамерного комплекса. Конститутивно активная киназная область TGFBR2 фосфорилирует TGFBR1, который, в свою очередь, активирует SMAD2 и SMAD3. Фосфорилированные SMAD образуют комплекс с SMAD4 и транслокируются в ядро для регуляции транскрипции генов-мишеней TGF-бета, контролируя остановку клеточного цикла, апоптоз, дифференцировку и производство внеклеточного матрикса.
• Неканонический сигналинг: В дополнение к каноническому пути SMAD, TGFBR2 задействует SMAD-независимые каскады, включая пути MAP-киназы, PI3K/AKT и Rho-подобных GTPаз, для модуляции миграции клеток, пролиферации и выживания.
• Связывание лиганда и аффинность: TGFBR2 связывает TGFB1, TGFB2 и TGFB3 с аффинностью в пикомолярном диапазоне без необходимости костимуляторных рецепторов, опосредуя начальный этап трансдукции сигнала TGF-бета.
• Субклеточная локализация: TGFBR2 в основном локализуется в клеточной мембране и мембранных рафтах, причем была обнаружена секретируемая форма в внеклеточной среде, что согласуется с его ролью в межклеточной коммуникации.
• Посттрансляционные модификации: Рецептор представляет собой гликопротеин с множественными внутримолекулярными дисульфидными связями, необходимыми для его третичной структуры. Он подвергается фосфорилированию по остаткам серина и треонина в своей киназной области и цитоплазматическом хвосте, что модулирует активность и нисходящий сигналинг.
• Сводка ключевых слов: Запись UniProt подчеркивает его участие в апоптозе, регуляции роста, дифференцировке и ассоциациях с заболеваниями, включая аневризму аорты, краниосиностоз и наследственный неполипозный колоректальный рак.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Дизайн иммуногена: Антитело было получено против рекомбинантного белка, охватывающего аминокислоты 23–280 человеческого TGFBR2, что включает N-концевой внеклеточный домен связывания лиганда. Этот регион относительно консервативен у человека, мыши и крысы, что объясняет наблюдаемую перекрестную реактивность; однако, эндогенные паттерны гликозилирования могут влиять на доступность эпитопа в нативных образцах.
• Рекомендации по вестерн-блоттингу (WB): Предполагаемый молекулярный вес TGFBR2 составляет примерно 65 кДа; однако, из-за гликозилирования вы можете наблюдать сдвиг полосы. Используйте восстанавливающие условия для четкого разрешения. Проведите валидацию в лизатах положительного контроля (например, HeLa, A549), известных экспрессией TGFBR2.
• Советы по иммуногистохимии (IHC-P): Для парафиновых срезов оптимизируйте демаскировку антигена (например, цитратный буфер pH 6,0 или EDTA pH 9,0) и протестируйте несколько концентраций первичного антитела (типичный диапазон 1:50–1:500). Ожидается мембранная окраска; включение ингибитора фосфатазы в блокирующие буферы может помочь сохранить фосфорилирование-зависимые эпитопы.
• Рекомендации по иммунофлуоресценции (IF/ICC): Поскольку TGFBR2 является трансмембранным рецептором, для детекции внутриклеточных эпитопов необходима пермеабилизация Triton X-100 или сапонином. Рекомендуется совместное окрашивание с маркерами мембраны или органелл для подтверждения локализации. Антитело также может распознавать секретируемую форму, поэтому рекомендуется тщательная фиксация для избежания внеклеточного фона.
• Использование в ELISA: Это поликлональное антитело можно использовать в качестве реагента для захвата или детекции в формате «сэндвич» ELISA. Проведите шахматные титрации для определения оптимальной концентрации покрытия (1–10 мкг/мл) и детекции, а также валидацию с использованием стандартов рекомбинантного белка TGFBR2.

CamelBio: Ваш единый мост для поставок

CamelBio предлагает оптимизированный опыт работы с одним поставщиком для производителей диагностических средств и исследовательских лабораторий, ищущих высококачественное сырье для исследований сигнального пути TGF-бета, фиброза и разработки анализов в онкологии. Мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, такие как это кроличье pAb против TGFBR2, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск сырья. Независимо от того, масштабируете ли вы существующий иммуноанализ или разрабатываете новую панель для обнаружения биомаркеров, CamelBio выступает вашим интегрированным партнером от концепции до клиники.