Поликлональная антитело кролика против TFAM для WB, IF/ICC, ELISA - Q00059

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация TFAM

• TFAM (транскрипционный фактор А митохондрий), также известный как MtTF1, TCF-6 и TCF6L2, является ключевым ядерно-кодируемым митохондриальным транскрипционным фактором, регулирующим экспрессию митохондриальных генов.
• Он формирует комплекс инициации митохондриальной транскрипции вместе с TFB2M и POLRMT, который необходим для базальной транскрипции митохондриальной ДНК (мтДНК).
  Связанные источники: PMID:29149603
• TFAM связывается с промоторами легкой цепи и HSP1, изгибая ДНК в U-образный поворот через свои домены HMG-box, что позволяет рекрутировать POLRMT и инициировать транскрипцию.
  Связанные источники: PMID:22037172, PMID:1737790
• Помимо транскрипции, TFAM критически важен для поддержания и упаковки мтДНК; он уплотняет мтДНК в нуклеоиды, а его доза строго регулирует количество копий мтДНК.
  Связанные источники: PMID:19304746, PMID:22841477, PMID:22037171
• В сотрудничестве с TFB2M TFAM обеспечивает раскрытие промотора и стабилизацию нетемплатной цепи ДНК — важный этап для точной транскрипции.
  Связанные источники: PMID:20410300
• TFAM локализуется в митохондриальном матриксе и нуклеоидах, где он также участвует в раскручивании и организации мтДНК.
• У него происходит альтернативный сплайсинг и фосфорилирование; болезнь-ассоциированные варианты связаны с первичными митохондриальными нарушениями.
• Как член семейства HMGB, TFAM использует два тандемных домена HMG-box для связывания, изгиба и формирования петель мтДНК, что способствует формированию архитектуры нуклеоида.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевой области 1–220 человеческого TFAM, которая включает тандемные домены HMG-box, поэтому антитело должно распознавать полноразмерный TFAM.
• Для Вестерн-блоттинга для оптимального детектирования рекомендуется использовать лизаты, обогащенные митохондриями; предсказанная молекулярная масса составляет ~29 кДа, но посттрансляционные модификации могут вызвать ее сдвиг.
• Для иммунофлуоресценции (IF) и иммуноцитохимии (ICC) ожидается пятнистый митохондриальный характер окрашивания; для подтверждения локализации рекомендуется совместное окрашивание с митохондриальным маркером.
• При проведении ИФА (ELISA) проведите титрование антитела с рекомбинантным TFAM или клеточными лизатами для определения оптимальных рабочих разведений.
• Из-за высокой консервативности последовательности у человека, мыши и крысы перекрестная реактивность вероятна, но рекомендуется валидировать антитело в вашей экспериментальной системе.

CamelBio: ваш единый центр по подбору реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям доступ в формате «одного окна» к высококачественным исходным материалам для ИВД, включая валидированные пары антител и крупные объемы вспомогательных реагентов. Это поликлональное антитело против TFAM является примером нашей приверженности предоставлению высококачественных реагентов для митохондриальных исследований и разработки диагностических тестов. Свяжитесь с нашей командой, чтобы обсудить индивидуальные решения по подбору реагентов для вашего следующего проекта.