Кроличье поликлональное антитело Anti-STIM1 PolymAb® для вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИП, ELISA - Q13586

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация STIM1

• STIM1 действует как сенсор Ca²⁺, который регулирует два основных входящих выпрямляющих Ca²⁺ канала в плазматической мембране: Ca²⁺-высвобождаемые активируемые Ca²⁺ (CRAC) каналы и арахидонат-регулируемые Ca²⁺-селективные (ARC) каналы, играя центральную роль в гомеостазе кальция. Связанные ссылки: PMID:15866891 PMID:16005298 PMID:16208375

• При истощении запасов Ca²⁺ в эндоплазматическом ретикулуме (ЭР) STIM1 олигомеризуется и перемещается с мембраны ЭР к соединениям ЭР-плазматическая мембрана, где он напрямую активирует субъединицы CRAC каналов ORAI1, ORAI2 и ORAI3, обеспечивая устойчивый и осциллирующий вход кальция. Связанные ссылки: PMID:16537481 PMID:32415068

• STIM1 участвует в формировании эмали, что подчеркивает его роль в тканеспецифических процессах кальцификации. Связанные ссылки: PMID:24621671

• Белок негативно регулирует ответ интерферона I типа, удерживая сигнальный адаптер STING в эндоплазматическом ретикулуме, тем самым предотвращая его активацию и последующую иммунную сигнализацию. Связанные ссылки: PMID:30643259

• STIM1 повсеместно экспрессируется в различных первичных клетках человека и опухолевых клеточных линиях, что подчеркивает его фундаментальную роль в клеточной физиологии.

• На субклеточном уровне STIM1 локализуется в клеточной мембране, мембране эндоплазматического ретикулума, цитоплазме, цитоскелете и саркоплазматическом ретикулуме, что соответствует его динамической шаттлинговой функции.

• Посттрансляционные модификации включают N-гликозилирование и фосфорилирование, которые могут регулировать его стабильность и активность. Белок содержит сигнальный пептид, одну трансмембранную спираль и цитоплазматический домен с coiled-coil структурой.

• Альтернативный сплайсинг генерирует несколько изоформ, которые могут демонстрировать тканеспецифическую экспрессию или обладать различными функциональными свойствами.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 530–685, область в пределах цитоплазматического C-концевого сегмента STIM1. Такая конструкция может способствовать детекции полноразмерного белка и определенных сплайс-вариантов, но может не обнаруживать изоформы, лишенные этой области. Проверяйте в вашей целевой клеточной линии или ткани.

• При вестерн-блоттинге ожидается преобладающая полоса около 77 кДа, хотя могут появляться дополнительные полосы из-за гликозилирования или альтернативного сплайсинга. Используйте соответствующие контроли загрузки и подтверждайте специфичность с помощью негативных контролей (например, нокдаун siRNA или нокаут CRISPR, если доступны).

• При иммуногистохимии (ИГХ-П) метод извлечения антигена и разведение антитела требуют оптимизации, поскольку внутриклеточная локализация STIM1 может требовать пермеабилизации. Включайте соответствующие изотипические контроли и проверяйте окрашивание на известных положительных и отрицательных тканях.

• Для иммунопреципитации (ИП) предварительно инкубируйте антитело с шариками протеина A/G для эффективного захвата и рассмотрите возможность сшивания (cross-linking) для предотвращения интерференции тяжелых/легких цепей в последующем вестерн-блоттинге. Подтверждайте со-преципитацию известных партнеров по взаимодействию, таких как ORAI1.

• Для ELISA титруйте антитело против иммуногена или клеточного лизата для определения оптимальных условий нанесения и детекции. Используйте в сочетании с подобранным детектирующим антителом или конъюгированным вторичным антителом для сэндвич-ELISA.

CamelBio: Ваш универсальный мост к поставкам

CamelBio — это ваш интегрированный шлюз к высококачественным сырьевым материалам для ИВД, соединяющий производителей диагностических систем, лаборатории и исследовательские институты с критически важными реагентами для исследований кальциевой сигнализации и ионных каналов. Помимо этого антитела к STIM1, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные рекомбинантные моноклональные антитела и сырьевые реагенты оптом, чтобы упростить разработку ваших анализов. Наша сеть поставок обеспечивает быстрый доступ к сырьевым материалам для редких мишеней, поддерживая ваши проекты от концепции до клинического применения.