Поликлональное кроличье антитело Anti-SREBF1 для WB, IF/ICC, ELISA — P36956

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация SREBF1

• SREBF1 (также известный как SREBP1, bHLHd1) кодирует транскрипционный фактор, связывающийся с регуляторными элементами стеролов и существующий в виде предшественника, встроенного в мембрану эндоплазматического ретикулума. При низкой концентрации стеролов он подвергается процессингу, в результате которого высвобождается форма транскрипционного фактора, перемещающаяся в ядро. Связанные публикации: PMID:32322062
• Расщеплённый SREBF1 связывается с регуляторным элементом стеролов 1 (SRE-1; 5'-ATCACCCCAC-3') и мотивами E-box (5'-ATCACGTGA-3') в промоторах генов, участвующих в биосинтезе холестерина и функционировании пути рецептора LDL, тем самым активируя их транскрипцию. Связанные публикации: PMID:12177166, PMID:32322062, PMID:8402897
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию изоформ с различной активностью: изоформа SREBP-1A (экспрессируемая в отдельных тканях) обладает высокой транскрипционной активностью и стимулирует экспрессию генов липогенеза и холестерогенеза, тогда как преобладающая изоформа SREBP-1C (экспрессируемая в печени, жировой ткани и других тканях) преимущественно регулирует гены липогенеза и обладает более слабой активностью. Связанные публикации: PMID:12177166, PMID:32497488
• Кроме того, существует изоформа, не требующая протеолитического процессинга в аппарате Гольджи и конститутивно активная в трансактивации промоторов генов липогенеза.
• Внутри клетки SREBF1 перемещается между эндоплазматическим ретикулумом и мембранами аппарата Гольджи; после активации фрагмент транскрипционного фактора высвобождается и перемещается в ядро. Он также обнаруживается в везикулах, покрытых COPII.
• SREBF1 является фосфопротеином и подвергается убиквитинированию, что соответствует особенностям регулируемых мембраносвязанных транскрипционных факторов.
• Белок широко экспрессируется, причём самые высокие уровни выявляются в печени и надпочечниках; в тканях плода пиковая экспрессия наблюдается в лёгких и печени. Связанные публикации: PMID:8402897
• SREBF1 играет критически важную роль в липидном обмене и связан с такими вариантами заболеваний, как ихтиоз.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Рекомбинантный иммуноген (аминокислоты 200–310 человеческого SREBF1) соответствует консервативному региону, что позволяет предположить, что антитело может распознавать несколько изоформ и потенциально давать перекрёстную реакцию с белками мыши и крысы, как указано выше.
• В экспериментах по вестерн-блоттингу ожидается полоса приблизительно на уровне 122 кДа, соответствующая полноразмерному предшественнику; в зависимости от содержания стеролов в клетке также может наблюдаться полоса меньшего размера (около 68 кДа), представляющая собой расщеплённый активный транскрипционный фактор.
• При иммунофлуоресценции локализация может включать цитоплазматический рисунок и/или распределение в эндоплазматическом ретикулуме при достаточном содержании стеролов, а также перемещение в ядро при истощении стеролов; рекомендуется проводить совместное окрашивание с маркерами органелл.
• Оптимальные разведения для WB, IF/ICC и ELISA следует определять эмпирически с использованием соответствующих положительных и отрицательных контролей.

CamelBio: ваш универсальный поставщик

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским группам комплексный доступ к сырью для IVD и технической поддержке — от разработки концепции до клинического применения. Для исследований липидного обмена и холестерина мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом, а также выполняем поиск редких мишеней на заказ, чтобы ускорить разработку анализов и получение регуляторного одобрения.