Кроличья поликлональная антитела против SQSTM1 для Вестерн-блоттинга (WB), ИФА (ELISA) - Q64337

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация SQSTM1

• SQSTM1, также известный как секвестосома-1 или p62, является индуцируемым стрессом цитоплазматическим адаптерным белком, который служит рецептором селективной аутофагии, связывая убиквитинированные белковые агрегаты с аппаратом аутофагии.
• Распознавание аутофагического груза: Как рецептор селективной аутофагии, SQSTM1 связывает убиквитинированный груз с аутофагосомами. Он подвергается фазовому разделению жидкость-жидкость при связывании с убиквитинированными белками через свой UBA-домен, формируя p62-тельца, которые затем рекрутируются в аутофагосомы через взаимодействие его LIR-мотива с белками семейства ATG8, что приводит к аутофагической деградации груза. Связанные ссылки: PMID:25723488, PMID:33397898
• Цитопротекторная сигнализация: SQSTM1 взаимодействует с KEAP1, секвестрируя его в инклюзионные тельца и тем самым предотвращая опосредованную KEAP1 деградацию NFE2L2/NRF2. Это приводит к ядерной аккумуляции NRF2 и экспрессии антиоксидантных и цитопротекторных генов. Связанные ссылки: PMID:20173742, PMID:20421418, PMID:24011591
• Регуляция пути NF-kappa-B: SQSTM1 действует как адаптер, опосредующий взаимодействие между TRAF6 и CYLD, тем самым влияя на активацию NF-kappa-B в ответ на цитокины, такие как TNF, NGF и интерлейкин-1. Связанные ссылки: PMID:14960283, PMID:18382763
• Субклеточная локализация: SQSTM1 локализуется в цитоплазматических агрегатах (p62-тельца), аутофагосомах, поздних эндосомах, лизосомах и ядре (тельца PML). Он также обнаруживается в эндоплазматическом ретикулуме и саркомерах миофибрилл, что отражает его разнообразные функции в контроле качества белков и сигнализации.
• Посттрансляционные модификации и структурные особенности: Белок подвергается ацетилированию, фосфорилированию, убиквитинированию и пальмитоилированию и содержит цинк-пальцевые домены. Эти модификации регулируют его активность, локализацию и стабильность.
• Распределение в тканях: SQSTM1 широко экспрессируется в различных тканях, что согласуется с его фундаментальной ролью в клеточном гомеостазе и стрессовых ответах.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 250-350 SQSTM1 мыши, область, которая может включать части PB1-домена и линкерные последовательности. Поликлональная природа этих антител может распознавать несколько эпитопов, обеспечивая надежный сигнал в Вестерн-блоттинге (WB).
• Для WB ожидается полоса около 48 кДа, но из-за склонности SQSTM1 к агрегации и подверженности посттрансляционным модификациям могут также появляться виды с более высокой молекулярной массой. Чтобы минимизировать агрегацию, нагревайте образцы в восстанавливающем буфере для загрузки перед электрофорезом.
• Для ИФА (ELISA) рассмотрите возможность использования рекомбинантного белка SQSTM1 или иммунизирующего пептида в качестве иммобилизованного антигена. Рекомендуется титрование как антител, так и антигена для оптимального соотношения сигнал/шум.
• Перекрестная реактивность с человеком, мышью и крысой подтверждается гомологией последовательностей; однако рекомендуется индивидуальная валидация для конкретного образца и применения.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio — это специализированный поставщик сырья для ИХД, предлагающий единую точку доступа к антителам, антигенам и техническим консультациям для производителей диагностических систем и исследовательских лабораторий. Эти поликлональные антитела против SQSTM1 поддерживают исследования аутофагии и клеточной сигнализации, и мы также можем предоставить валидированные пары антител, оптимизированные рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты в больших объемах для ускорения разработки ваших тест-систем. Свяжитесь с нами, чтобы обсудить индивидуальные составы или поиск реагентов для редких мишеней для вашего следующего проекта.