Моноклональное антитело против гликопротеина шипа для Вестерн-блоттинга, ИФ/ИЦХ, ИФА - P0DTC2

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация гликопротеина шипа

• Гликопротеин шипа (S) — это вирусный белок слияния I класса, ответственный за проникновение SARS-CoV-2 в клетки-хозяева.
• S-белок прикрепляется к клетке-хозяину, взаимодействуя с рецептором ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE2), инициируя инфекцию (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Связанные ссылки: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Протеолитическое расщепление в сайте S2/S2' протеазами хозяина TMPRSS2 или катепсином L запускает необратимые конформационные изменения, приводящие к слиянию вирусной и клеточной мембран (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616, PubMed:34561887). Связанные ссылки: PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• К альтернативным рецепторам входа в клетку-хозяина относятся нейропилин-1/2 (NRP1/NRP2) и рецептор асиалогликопротеина 1 (ASGR1), что может объяснять тропизм к обонятельным эпителиальным клеткам и ACE2-независимые пути проникновения (PubMed:33082294, PubMed:33082293, PubMed:34837059). Связанные ссылки: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:34837059
• Белок содержит спиральные спиральные (coiled coil) домены, дисульфидные связи и сильно гликозилирован, что соответствует его роли вирусного белка слияния оболочки.
• Субклеточная локализация включает мембрану вириона, промежуточный компартмент эндоплазматического ретикулума-Гольджи хозяина и мембрану клетки-хозяина.
• Он способствует уклонению вируса от иммунного ответа, подавляя врожденные иммунные реакции хозяина и противодействуя рестрикции со стороны тетерина (BST-2).
• Стеблевой домен S содержит три шарнира, обеспечивающие неожиданную ориентационную свободу головному домену, что, вероятно, способствует связыванию с рецептором (PubMed:32817270). Связанные ссылки: PMID:32817270

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген был получен против рекомбинантного фрагмента белка 3CLpro; потенциальную перекрестную реактивность с гликопротеином шипа (P0DTC2) следует валидировать в контексте вашего конкретного анализа.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) ожидается полоса около 141 кДа в восстановительных условиях; оптимизируйте подготовку образца и разведение антител, чтобы минимизировать неспецифическое связывание.
• Для иммунофлуоресценции (ИФ/ИЦХ) рассмотрите возможность использования фиксации 4% параформальдегидом и пермеабилизации 0,1% Triton X-100; включите соответствующие контроли для подтверждения специфичности окрашивания.
• Для применения в ИФА титруйте как антитело, так и антиген, чтобы достичь надежного соотношения сигнал/шум; может потребоваться оценка перекрестной реактивности с другими коронавирусными белками.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio — ваш интегрированный партнер по поставкам сырья для ИХД, предлагающий валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты в больших объемах. Это антитело против шипа SARS-CoV-2 поддерживает исследования патогенеза вируса и разработку диагностических тестов. Мы также специализируемся на закупке сырья для редких мишеней и техническом консультировании, чтобы помочь ускорить ваш проект от концепции до клиники.