Кроличье поликлональное антитело против SLC12A1 для Вестерн1 блоттинга, ИФА - Q13621

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация SLC12A1

• SLC12A1 кодирует специфичный для почек котранспортер Na-K-2Cl (NKCC2), член семейства переносчиков растворенных веществ 12, который опосредует электронейтральный симпорт ионов натрия, калия и хлорида через апикальную мембрану толстого восходящего колена (TAL) петли Генле. Связанные ссылки: PMID:21321328
• NKCC2 необходим для трансепителиальной реабсорбции NaCl в TAL, обеспечивая концентрацию мочи и регуляцию объема; он служит основной мишенью петлевых диуретиков, таких как буметанид.
• Транспортер может функционально замещать калий на аммоний (NH4+), способствуя апикальной секреции NH4+ в мозговом TAL, что является критическим процессом для поддержания почечного гомеостаза аммония при метаболическом ацидозе.
• Экспрессия SLC12A1 высокоспецифична для почек, локализация белка ограничена апикальной плазматической мембраной клеток коркового и мозгового толстых восходящих колен.
• Посттрансляционные модификации включают N-гликозилирование и фосфорилирование, которые регулируют транспорт белка и его активность в ответ на вазопрессин и другие гормональные сигналы.
• Мутации в SLC12A1 вызывают синдром Барттера 1 типа, почечное заболевание с потерей соли, характеризующееся гипокалиемическим алкалозом, гиперкальциурией и полиурией, что подчеркивает критическую роль NKCC2 в балансе электролитов.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический пептид, соответствующий остаткам 50–150 человеческого SLC12A1. Проверьте консервативность эпитопа при использовании нечеловеческих образцов, хотя сообщается о перекрестной реактивности с мышиным и крысиным белком.
• Для Вестерн блоттинга NKCC2 (предсказанная ММ ~121 кДа) рассмотрите использование геля с низким процентом полиакриламида (например, 6–8%) и увеличенное время переноса для обеспечения эффективного переноса этого крупного гликозилированного мембранного белка.
• Включайте ингибиторы фосфатаз в буферы для лизиса и рассмотрите возможность обработки фосфатазой для разрешения сдвигов полос, зависящих от фосфорилирования, поскольку активность NKCC2 регулируется фосфорилированием в ответ на гормоны.
• Для применения в ИФА может подойти конкурентный формат анализа с иммунизирующим пептидом или формат захвата с использованием рекомбинантного фрагмента внеклеточного домена; оптимизируйте буфер для иммобилизации и условия блокирования для минимизации неспецифического связывания.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio — надежный поставщик сырья для ИФА, предлагающий валидированные антитела, реагенты оптом и услуги по индивидуальному поиску материалов. Это поликлональное антитело против SLC12A1 поддерживает исследования почечного ионного транспорта и водного гомеостаза, и мы можем помочь вам в поиске дополнительных реагентов для изучения функции почек или разработки диагностических тестов.