Кроличья поликлональная антитело к SIGLEC3/CD33 для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - P20138

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация SIGLEC3/CD33

• CD33 (Siglec-3, p67, gp67) — это трансмембранный белок типа I с одним трансмембранным доменом, член семейства сиалин-связывающих иммуноглобулин-подобных лектинов (Siglec), характеризующийся N-концевым V-подобным Ig-доменом и цитоплазматическим хвостом, содержащим два иммунорецепторных тирозин-ингибирующих мотива (ITIM).
• Выполняет функцию ингибирующего рецептора; при связывании сиалиновых лигандов или C1q ITIM-мотивы фосфорилируются Src-подобными киназами, такими как LCK, что приводит к рекрутированию тирозинфосфатаз PTPN6/SHP-1 и PTPN11/SHP-2, которые подавляют иммунную сигнализацию (PubMed:10887109, 10556798, 10206955). Связанные ссылки: PMID:10887109, PMID:10556798, PMID:10206955
• Предпочтительно связывает сиаловые кислоты с альфа-2,3- и альфа-2,6-связями, с более высоким сродством к альфа-2,6-связанным гликанам (PubMed:7718872). Связанные ссылки: PMID:7718872
• Репрессивный эффект CD33 на активацию моноцитов включает сигнальный путь фосфоинозитид-3-киназы (PI3K) (PubMed:15597323). Связанные ссылки: PMID:15597323
• На субклеточном уровне CD33 локализуется на плазматической мембране и в пероксисомах.
• Экспрессируется специфически на клетках моноцитарно-миелоидного ряда, включая моноциты, макрофаги и гранулоциты; в центральной нервной системе в основном обнаруживается на клетках микроглии.
• Ключевые слова подчеркивают его роль в клеточной адгезии, иммунной регуляции и альтернативном сплайсинге, с документально подтвержденными модификациями гликопротеина и фосфопротеина.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 49-259 человеческого CD33 (внеклеточный домен), который включает сиалин-связывающий V-подобный Ig-домен. Такая конструкция нацелена на нативную конформацию, что делает антитело пригодным для детекции поверхностно экспрессированного CD33 в приложениях, подобных проточной цитометрии (ИФ/ИЦХ), и в иммуногистохимии (ИГХ-П).
• Для Вестерн-блоттинга ожидаемая молекулярная масса белка составляет ~40 кДа, но из-за гликозилирования наблюдаемая полоса может иметь более высокую молекулярную массу. Рекомендуется использовать восстанавливающий гель и валидировать с помощью соответствующих положительных контролей (например, миелоидных клеточных линий, таких как HL-60 или THP-1).
• При использовании этого поликлонального антитела в иммунопреципитации или ИФА следует учитывать, что поликлональная природа может повысить чувствительность, но также увеличить фон; рекомендуется оптимизация условий блокирования и промывки.
• Перекрестная реактивность с мышиным и крысиным белком подразумевает консервативные эпитопы; однако для конкретных экспериментальных условий следует проверять выравнивание последовательностей, и валидация на соответствующем виде является обязательной.
• Для ИГХ-П следует оптимизировать методы демаскировки антигена (например, цитратный буфер, pH 6.0) и условия фиксации ткани, так как доступность эпитопа может варьироваться.
• Это антитело подходит в качестве захватывающего или детектирующего компонента в сэндвич-ИФА, если оно используется в паре с совместимым антителом; пользователям следует проверять его работу в своих конкретных буферных системах.

CamelBio: Ваш мост к комплексным решениям

CamelBio предлагает широкий спектр сырья для in vitro диагностики, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты в больших объемах, для поддержки производителей диагностических систем и исследовательских лабораторий. Наши комплексные решения охватывают ключевые мишени, такие как CD33, для иммунного мониторинга и разработки онкологических тест-систем. Кроме того, мы предлагаем поиск сырья для редких мишеней, техническую поддержку и консалтинг, упрощая ваш путь от концепции до клинического применения.