Поликлональное кроличье антитело Anti-SERCA2/ATP2A2 для WB, IHC-P — P16615

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функции и локализация SERCA2/ATP2A2

• Саркоплазматический/эндоплазматический ретикулумный кальциевый АТФазный насос 2 (SERCA2), также известный как кальциевый насос 2, кодируется геном ATP2A2 и относится к семейству P-типов катион-транспортирующих АТФаз. В результате альтернативного сплайсинга образуются несколько изоформ с тканеспецифичной экспрессией.
• SERCA2 представляет собой магний-зависимый фермент, который катализирует гидролиз АТФ, сопряжённый с транслокацией ионов кальция из цитозоля в просвет саркоплазматического или эндоплазматического ретикулума, что необходимо для поддержания внутриклеточного кальциевого гомеостаза. Связанные ссылки: PMID:12542527 PMID:16402920
• Этот насос играет ключевую роль в цикле сокращения/расслабления мышечных клеток, регулируя обратный захват кальция в саркоплазматический ретикулум.
• Помимо участия в работе мышц, SERCA2 задействован в аутофагии: взаимодействуя с VMP1, он контролирует контакты мембран изолирующих участков ЭПР, необходимые для образования аутофагосом, а также регулирует контакты с липидными каплями, митохондриями и эндосомами. Связанные ссылки: PMID:28890335
• В остеокластах SERCA2 действует как регулятор кальциевой сигнализации, опосредованной TNFSF11, взаимодействуя с TMEM64 и способствуя активации NFATC1 и генерации митохондриальных активных форм кислорода, критически важных для дифференцировки остеокластов.
• На субклеточном уровне SERCA2 локализуется в мембране эндоплазматического ретикулума и мембране саркоплазматического ретикулума, что отражает его роль во внутриклеточном хранении кальция и передаче сигналов.
• Экспрессия в тканях различается: изоформа 1 широко экспрессируется в гладкой мускулатуре и немышечных тканях, причём высокий уровень наблюдается в печени, поджелудочной железе и лёгких, тогда как изоформы 2 и 3 преимущественно обнаруживаются в сердечной и медленно сокращающейся скелетной мускулатуре.
• К основным посттрансляционным модификациям относятся связывание нуклеотидов, фосфорилирование и дисульфидные связи; белок также подвергается нитрованию, что подтверждается многочисленными фосфопротеомными исследованиями.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Это поликлональное антитело получено против рекомбинантного фрагмента человеческого SERCA2/ATP2A2, охватывающего аминокислоты 111–253 (консервативный участок). Оно может распознавать несколько изоформ и перекрёстно реагировать с SERCA2 мыши и крысы, что было подтверждено.
• При проведении вестерн-блоттинга ожидается полоса около 115 кДа. Оптимизируйте условия восстановления/невосстановления и рассмотрите использование контрольных образцов из тканей с высокой экспрессией SERCA2, например печени и сердца.
• Для иммуногистохимии (парафиновые срезы) используйте подходящие методы демаскировки антигенов и подтвердите окрашивание на тканях, для которых известна экспрессия SERCA2. Включайте положительные и отрицательные тканевые контроли.
• Для применения в ИФА используйте рекомбинантный иммуноген или очищенный белок в качестве антигена для сорбции. Проверьте условия сорбции и серию разведений антитела.
• Как и в случае любого поликлонального антитела, для количественных анализов следует проверять межсерийную воспроизводимость. При смене серии рекомендуется проводить предварительные пилотные эксперименты.

CamelBio: ваш универсальный поставщик

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям интегрированный доступ к высококачественному сырью для ИВД: от валидированных пар антител и оптимизированных моноклональных/поликлональных антител до вспомогательных реагентов оптовыми партиями. Наша команда упрощает закупки реагентов для исследований кальциевой сигнализации и мембранного транспорта, включая редкие или изготовленные по индивидуальному заказу реагенты. Благодаря опыту на всех этапах — от разработки концепции до клинического применения — мы помогаем оптимизировать процесс разработки без ущерба для качества.