Поликлональные антитела кролика против внеклеточного домена S2 спайка SARS-CoV-2 для WB, DB, IF/ICC, IP и ELISA - P0DTC2

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация шикового гликопротеина (S)

• Шиковый (S) гликопротеин — это белок слияния вируса класса I, который расщепляется на субъединицы S1 и S2. S1 содержит домен, связывающий рецептор, а S2 закрепляет белок и выполняет слияние мембран.
• S1 присоединяется к рецептору хозяина ACE2, чтобы инициировать инфекцию. Альтернативными рецепторами входа являются нейропилин-1 (NRP1), нейропилин-2 (NRP2), интегрины и рецептор асиалогликопротеина 1 (ASGR1), которые могут способствовать тропизму SARS-CoV-2 в клетках с низкой экспрессией ACE2.
  Связанные ссылки:
  PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086, PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• Протеолитическое расщепление S2 на сайте S2' хозяином TMPRSS2 (на поверхности клетки) или катепсином L (в эндосоме) запускает необратимые конформационные изменения, которые приводят к слиянию вирусной оболочки с мембраной хозяина и высвобождению вирусного генома в цитоплазму.
  Связанные ссылки:
  PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• Субъединица S2 содержит области гептадных повторов (HR1 и HR2), которые складываются в шестиспиральный пучок, сближая вирусную и клеточную мембраны для слияния.
• Внутриклеточно шиковый белок локализуется в мембране вириона, промежуточном компартменте ЭПР-аппарата Гольджи хозяина (ERGIC) и плазматической мембране клетки хозяина.
• Шиковый белок сильно N-гликозилирован и пальмитоилирован, содержит дисульфидные связи и функционирует как суперантиген; он также подавляет врожденный иммунный ответ хозяина и противодействует тетерину.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает внеклеточный домен S2 (а.а. 686-1214), включая консервативные функциональные элементы, такие как пептид слияния и гептадные повторы. Эта конструкция позволяет обнаруживать S2 даже после сброса S1.
• Для вестерн-блоттинга полноразмерный шиковый белок мигрирует при ~141 кДа в восстанавливающих условиях; полоса ~70-80 кДа может наблюдаться для расщепленного S2. Проверьте условия лизиса и подготовки образца.
• При иммунофлуоресценции/ICC включите этап пермеабилизации для обнаружения шикового белка, локализованного внутриклеточно (в ERGIC), в дополнение к плазматической мембране.
• Для «сэндвич»-ELISA рассмотрите возможность использования этого pAb в паре с моноклональным антителом против субъединицы S1 для специфического измерения полноразмерного шикового белка или используйте его как реагент для детекции для количественного определения уровней S2.
• Дот-блот (DB) можно использовать для быстрого скрининга экспрессии антигена в лизатах клеток или рекомбинантных белках; оптимизируйте концентрацию антигена и условия буфера.
• Иммунопреципитация (IP) может захватывать комплексы шикового белка; включите соответствующие отрицательные контроли для оценки неспецифического связывания.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и исследовательским институтам комплексный доступ к сырью для IVD, техническим услугам и консалтингу — охватывая все этапы от концепции до клиники. Для исследований шикового белка SARS-CoV-2 и разработки серологических анализов наша платформа снабжения предлагает валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, а также вспомогательные реагенты оптом. Независимо от того, нужно ли вам сырье для редких мишеней или надежное поставки для крупномасштабного производства, CamelBio закрывает ваши потребности в области IVD.