Моноклональное антитело против 3CLpro SARS-CoV-2 для Вестерн-блоттинга, ИФ/ИЦК, ИФА - P0DTC2

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация шиповидного гликопротеина

• Шиповидный гликопротеин (S) представляет собой тримерный белок слияния I класса, который опосредует проникновение вируса путем связывания с рецептором хозяина ангиотензинпревращающим ферментом 2 (ACE2) (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Связанные ссылки: PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• После связывания с рецептором белок S подвергается протеолитическому расщеплению в участке S2' протеазами хозяина, такими как TMPRSS2 или катепсин L, что запускает необратимые конформационные изменения, приводящие к слиянию мембран (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616, PubMed:34561887). Связанные ссылки: PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616 PMID:34561887
• S-белок также способен использовать альтернативные рецепторы для проникновения, включая нейропилин-1 (NRP1) и нейропилин-2 (NRP2), что может способствовать инфицированию клеток обонятельного эпителия с низкой экспрессией ACE2 (PubMed:33082294, PubMed:33082293). Связанные ссылки: PMID:33082294 PMID:33082293
• Кроме того, рецептор асиалогликопротеина 1 (ASGR1) может служить альтернативным рецептором независимо от ACE2 (PubMed:34837059). Связанные ссылки: PMID:34837059
• S-белок локализуется в мембране вириона, а также обнаруживается в промежуточном компартменте эндоплазматического ретикулума и аппарата Гольджи (ERGIC) хозяина и в мембране клетки хозяина во время инфекции.
• Он содержит два региона гептадных повторов (HR1 и HR2), которые образуют структуру шестиспирального пучка, критически важную для слияния мембран, и белок сильно гликозилирован с множественными дисульфидными связями и сайтами пальмитоилирования.
• S-белок также действует как суперантиген и подавляет врожденные иммунные ответы хозяина, включая антагонизм тетерина, способствуя уклонению от иммунитета.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• При Вестерн-блоттинге (WB) может наблюдаться полоса на уровне ~34 кДа (мономер 3CLpro); рассмотрите возможность использования ингибиторов протеаз при подготовке образца для предотвращения деградации вирусной протеазы.
• При иммунофлуоресценции (IF/ICC) обеспечьте надлежащую фиксацию и пермеабилизацию для обнаружения цитоплазматического 3CLpro в инфицированных SARS-CoV-2 клетках; провалидацию проведите в соответствующих линиях клеток с положительным контролем.
• Для применения в ИФА может потребоваться титрование антитела и рекомбинантного антигена 3CLpro; рассмотрите формат сэндвич-ИФА для высокой чувствительности.
• Из-за консервативности последовательности нельзя исключить перекрестную реактивность с 3CLpro других коронавирусов; проверьте специфичность в соответствующей системе образцов.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio предлагает производителям диагностических средств, лабораториям и исследовательским институтам упрощенный путь для закупки сырья для IVD, включая валидированные пары антител, моноклональные/поликлональные антитела и вспомогательные реактивы оптом. Как часть нашего портфолио для исследований инфекционных заболеваний, это антитело к 3CLpro SARS-CoV-2 поддерживает разработку анализов, связанных с COVID-19. Свяжитесь с нашей командой для индивидуальной закупки редких мишеней или технических консультаций от концепции до клиники.