Поликлональная антитела кролика к S100A8 для WB, IHC-P, ELISA — P27005

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая характеристика: функция и локализация S100A8

• S100A8 — небольшой белок, связывающий кальций и цинк (10295 Да), принадлежащий к семейству S100, также известный как кальгранулин А, MRP-8, p8 и CP-10.
• Он играет важную роль в регуляции воспалительных процессов и врожденных иммунных ответов, в основном за счет индукции хемотаксиса и адгезии нейтрофилов.
• Внутриклеточно в составе комплекса S100A8/A9 (кальпротектин) он облегчает транспорт арахидоновой кислоты лейкоцитами, модулирует реорганизацию цитоскелета, зависимую от тубулина, во время миграции фагоцитов и активирует НАДФН-оксидазу за счет стимуляции сборки ферментного комплекса и переноса арахидоновой кислоты к этому комплексу.
• Внеклеточно S100A8 действует как алармин или молекула DAMP, связываясь с паттернраспознающими рецепторами, такими как TLR4 и AGER, что запускает сигнальные пути MAP-киназы и NF-κB для усиления провоспалительных каскадов; он также обладает прямой антимикробной активностью за счет хелатирования Zn²⁺.
• Этот белок может индуцировать гибель клеток через аутофагию и апоптоз за счет перекрестного взаимодействия между митохондриями и лизосомами с участием АФК и BNIP3, а также регулирует выживаемость нейтрофилов через сигнальные пути MEK-ERK, опосредованные ITGAM/ITGB и TLR4.
• Согласно ключевым словам и функциональным данным UniProt, S100A8 участвует в реакциях S-нитрозилирования в составе транситрозилазного комплекса iNOS-S100A8/A9, способствуя сайт-специфической модификации белков-мишеней.
• Субклеточно S100A8 обнаруживается в цитоплазме, ассоциирован с цитоскелетом, расположен на клеточной мембране, а также секретируется во внеклеточное пространство.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• В качестве иммуногена использовали рекомбинантный белок, включающий аминокислотные остатки 1–89 мышиного S100A8 (NP_038678.1). Поскольку эта последовательность соответствует практически полноразмерному белку с прогнозируемой молекулярной массой около 10 кДа, антитело должно распознавать нативную форму. При проведении Вестерн-блота ожидайте полосу в диапазоне 10–12 кДа; восстановление и денатурация могут способствовать полной экспозиции эпитопа.
• Как поликлональное антитело, оно может иметь небольшие вариации между разными сериями; рекомендуем валидировать эффективность с использованием известного положительного контроля, такого как лизат костного мозга или селезенки мыши, или клеток, стимулированных к экспрессии S100A8 (например, макрофагов, обработанных ЛПС).
• Для иммуногистохимии (IHC-P) необходимо оптимизировать условия антигенной демаскировки (например, термоиндуцированная демаскировка эпитопа в цитратном буфере pH 6,0), также может потребоваться ингибирование эндогенной пероксидазы. Обратите внимание на указанную перекрестную реактивность с тканями крысы.
• При применении в ELISA иммобилизуйте рекомбинантный S100A8 или используйте формат сэндвича с подобранной парой антител; подтверждайте специфичность с помощью соответствующих отрицательных контролей.

CamelBio: ваш универсальный канал поставки

Это антитело к S100A8 подходит для исследований воспаления и врожденного иммунитета, а CamelBio упрощает путь от открытия мишени до разработки диагностики. Помимо отдельных антител, мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные панели моноклональных и поликлональных антител, вспомогательные реактивы оптом и организуем гибкую поставку редких мишеней. От идеи до клиники CamelBio является вашим комплексным партнером по сырью для ИВД, сокращая сроки разработки без ущерба для качества и надежности.