Кроличье моноклональное антитело против RXRα для Вестерн-блоттинга, ИП, ИФ/ИЦХ, ХИП, ХИП-seq, ИФА - P19793

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация RXRα

• RXRα (рецептор ретиноевой кислоты RXR-альфа) – это ядерный рецептор, кодируемый геном RXRA, также обозначаемый NR2B1. Он принадлежит к суперсемейству ядерных рецепторов и функционирует как лиганд-зависимый фактор транскрипции, связывающий 9-цис-ретиноевую кислоту с высоким сродством. PubMed:1310260 Связанные ссылки: PMID:1310260

• В ядре RXRα образует гетеродимеры с рецепторами ретиноевой кислоты (RAR) и связывается с элементами ответа на ретиноевую кислоту (RARE), состоящими из тандемных сайтов 5'-AGGTCA-3' (DR1-DR5). В отсутствие лиганда гетеродимеры RXR-RAR рекрутируют корепрессорные комплексы, которые способствуют деацетилированию гистонов и конденсации хроматина, репрессируя транскрипцию. Связывание лиганда запускает диссоциацию корепрессора и рекрутирование коактиваторов, что приводит к активации транскрипции. PubMed:10195690, PubMed:11162439, PubMed:11915042, PubMed:20215566, PubMed:37478846, PubMed:9267036 Связанные ссылки: PMID:10195690 PMID:11162439 PMID:11915042 PMID:20215566 PMID:37478846 PMID:9267036

• RXRα служит общим гетеродимерным партнером для многих других ядерных рецепторов, включая PPARα. Гетеродимер RXRA/PPARA необходим для транскрипционной активности PPARα на генах окисления жирных кислот, таких как ACOX1, и генов системы цитохрома P450. PubMed:10195690, PubMed:11915042, PubMed:28167758 Связанные ссылки: PMID:10195690 PMID:11915042 PMID:28167758

• Субклеточная локализация включает ядро, где он осуществляет транскрипционные регуляторные функции, а также цитоплазму и митохондрии. Его шаттлинг может облегчать ядерный импорт партнеров по гетеродимеризации, таких как VDR и NR4A1. PubMed:12145331, PubMed:15509776 Связанные ссылки: PMID:12145331 PMID:15509776

• RXRα подвергается множественным посттрансляционным модификациям, включая ацетилирование, фосфорилирование и убиквитинирование (образование изопептидной связи). Эти модификации регулируют его стабильность, сродство к ДНК и транскрипционную активность. Ключевые слова: Ацетилирование, Фосфопротеин, Ubl-конъюгация, Изопептидная связь.

• Помимо метаболической регуляции, RXRα играет роль во врожденном иммунитете, негативно регулируя противовирусные гены, такие как интерферон I типа, тем самым ослабляя иммунные ответы во время вирусной инфекции. Он также способствует фагоцитозу миелинового дебриса и ремиелинизации в макрофагах. PubMed:25417649, PubMed:26463675 Связанные ссылки: PMID:25417649 PMID:26463675

• Экспрессия в тканях широкая: высоко экспрессируется в печени, почках и мозге; также обнаруживается в фибробластах легких и моноцитах. Его роль в клеточном старении связана с репрессией ITPR2 и регуляцией кальциевой сигнализации. PubMed:30216632, PubMed:26463675, PubMed:14702039, PubMed:2159111, PubMed:24275569 Связанные ссылки: PMID:30216632 PMID:26463675 PMID:14702039 PMID:2159111 PMID:24275569

• Гетеродимер RXRα/RARB может действовать либо как транскрипционный репрессор, либо как активатор в зависимости от контекста ДНК-элемента RARE, что подчеркивает его универсальную роль в регуляции генов. PubMed:29021580 Связанные ссылки: PMID:29021580

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевой области (а.о. 1-100) человеческого RXRα, домену, участвующему в лиганд-зависимой трансактивации и, возможно, во взаимодействиях с корегуляторами. Эта стратегия дизайна может обеспечить высокую специфичность и аффинность как к немодифицированным, так и к посттрансляционно модифицированным формам рецептора.

• Антитело валидировано для Вестерн-блоттинга для детекции полосы при 51 кДа. Учитывая повсеместную экспрессию RXRα в печени, почках и мозге, эти ткани служат подходящими позитивными контролями. Для иммунопреципитации (ИП) рассмотрите возможность использования ядерных экстрактов из культур клеток или образцов тканей.

• В хроматин-иммунопреципитации (ХИП) и ChIP-seq RXRα рекрутируется к RARE по всему геному. Хорошо охарактеризованным локусом для позитивного контроля является ген рецептора ретиноевой кислоты бета (RARB), который содержит канонический DR5 RARE. Для наилучших результатов обрабатывайте клетки 9-цис-ретиноевой кислотой или полностью транс-ретиноевой кислотой перед сшиванием.

• Для иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (ИФ/ИЦХ) это антитело можно использовать для мониторинга транслокации RXRα в ядро после стимуляции лигандом. Совместное окрашивание с ядерным маркером или маркерами органелл (например, митохондриальным красителем) может дать дополнительный контекст локализации.

• При выполнении сэндвич-ИФА использование этого моноклонального антитела в паре с поликлональным детектирующим антителом, нацеленным на другой эпитоп, может повысить чувствительность. Валидируйте анализ с использованием стандартов рекомбинантного белка RXRα и проверяйте перекрестную реактивность с другими изоформами RXR (RXRβ, RXRγ) по мере необходимости.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio соединяет производителей диагностических средств, исследовательские лаборатории и академические институты с широким портфелем сырья для ИВД, включая валидированные пары антител, рекомбинантные белки антигенного качества и вспомогательные реагенты. Это анти-RXRα моноклональное антитело служит надежным ключевым компонентом для разработки лиганд-связывающих анализов, наборов для эпигенетической детекции и мультиплексных панелей профилирования белков. Помимо этих каталогных решений, наша команда предоставляет услуги по индивидуальному производству моноклональных/поликлональных антител, поиску сырья для редких мишеней и программы оптовых поставок для оптимизации вашего конвейера разработки ИВД от концепции до клиники.