Кроличье моноклональное антитело против RUNX2 для Вестерн-блоттинга, иммунопреципитации, ELISA - Q13950

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация RUNX2

• Runt-связанный транскрипционный фактор 2 (RUNX2), также известный как белок острого миелоидного лейкоза 3 (AML3), альфа-1 субъединица костного фактора (CBFA1) и остеобласт-специфичный транскрипционный фактор 2 (OSF2), является ДНК-связывающим транскрипционным фактором.
• RUNX2 является главным регулятором остеобластной дифференцировки и морфогенеза скелета, необходимым для созревания остеобластов как при внутримембранном, так и при эндохондральном окостенении. Связанные ссылки: PMID:28505335, PMID:28703881, PMID:28738062
• Он связывается с консенсусной последовательностью 5'-PYGPYGGT-3' в энхансерах и промоторах генов, критических для остеогенеза и гемопоэза, включая остеокальцин, остеопонтин, костный сиалопротеин, коллаген альфа 1(I), LCK, IL-3 и GM-CSF.
• В остеобластах RUNX2 синергирует с SPEN/MINT, усиливая FGFR2-опосредованную активацию FGF-чувствительного элемента остеокальцина (OCFRE), и ингибирует KAT6B-зависимую транскрипционную активацию.
• На субклеточном уровне RUNX2 локализуется как в ядре, так и в цитоплазме.
• Его экспрессия высокоспецифична для остеобластов, что отражает его ключевую роль в формировании костной ткани.
• RUNX2 подвергается множественным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, метилирование и убиквитинирование, которые регулируют его активность и стабильность, и ассоциирован с вариантами заболеваний, связанными с скелетной дисплазией.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 336–439 в C-концевой области человеческого RUNX2; распознавание эпитопа может зависеть от посттрансляционных модификаций или конформационного контекста в этом домене.
• Для Вестерн-блоттинга используйте тотальные клеточные лизаты остеобластоподобных клеточных линий (например, Saos-2, MG-63) или культур, дифференцированных в остеокласты, и ожидайте основную полосу около 57 кДа; валидируйте с соответствующими контролями загрузки.
• При иммунопреципитации титруйте количество антитела против фиксированного количества лизата и оптимизируйте условия лизирующего буфера (например, RIPA с ингибиторами протеаз/фосфатаз) для сохранения белковых взаимодействий.
• Для ELISA рассмотрите возможность использования рекомбинантного фрагмента RUNX2, охватывающего последовательность иммуногена, в качестве стандарта; проверяйте перекрестную реактивность с мышиными образцами при применении в моделях заболеваний грызунов.
• Перекрестная реактивность с мышиным белком позволяет проводить сравнительные исследования в культурах мышиных остеобластов или трансгенных костных моделях, но всегда проверяйте работу в конкретном интересующем типе ткани или клеток.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и исследовательским институтам беспрепятственный доступ к широкому портфолио сырья для IVD и индивидуальной технической поддержке. Для исследований в области биологии костей и скелетных нарушений мы поставляем валидированные моноклональные антитела, такие как это антитело против RUNX2, а также подобранные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты оптом. Наша интегрированная модель поставок сопровождает ваш проект от первоначальной концепции до клинического применения, обеспечивая надежными, высококачественными материалами, когда они вам нужны.