Поликлональное антитело кролика против Rubicon для Вестерн-блоттинга, ИФА - Q92622

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация Rubicon

• Rubicon (Run domain Beclin-1-interacting and cysteine-rich domain-containing protein), также известный как Baron, кодируется геном RUBCN (KIAA0226). Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ.
• Rubicon функционирует как центральный ингибитор аутофагии и эндосомального трафика: он подавляет активность PIK3C3, ухудшает функцию комплекса PI3KC3-C2, блокирует созревание аутофагосом и предотвращает UVRAG-зависимую активацию Rab7 на эндосомах. Связанные ссылки: PMID:20974968 PMID:21062745
• В активированных макрофагах Rubicon способствует антибактериальным ответам, стабилизируя комплекс NADPH-оксидазы CYBA:CYBB, усиливая TLR2-зависимую продукцию АФК и фагоцитарное уничтожение. Связанные ссылки: PMID:22423966
• После грибковой или вирусной инфекции Rubicon негативно регулирует выработку провоспалительных цитокинов, связывая CARD9 и изолируя его от сигнальных комплексов. Связанные ссылки: PMID:22423967
• На субклеточном уровне Rubicon локализуется в поздних эндосомах, лизосомах и ранних эндосомах, что согласуется с его ролями в эндоцитарном трафике и регуляции аутофагосом.
• Белок содержит фосфосайты и подвергается посттрансляционной модификации; он вовлечен в пути нейродегенерации и идентифицирован в протеомных исследованиях.
• Предсказанная молекулярная масса составляет 108.6 кДа; экспериментально мигрирует примерно на 109 кДа при SDS-PAGE.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевому домену (аминокислоты 1-200), который может детектировать все известные изоформы. Проверяйте специфичность в соответствующих клеточных и тканевых лизатах.
• Для Вестерн-блоттинга рассмотрите использование восстанавливающего SDS-PAGE и нитроцеллюлозной мембраны; ожидаемая полоса ~109 кДа.
• Оптимальные рабочие концентрации должны определяться экспериментально; типичные стартовые разведения для поликлональных антител в Вестерн-блоттинге составляют от 1:500 до 1:2000.
• Антитело перекрестно реагирует с Rubicon мыши и крысы, что делает его пригодным для сравнительных исследований на грызунах.
• Для ИФА рассмотрите использование рекомбинантного иммуногена в качестве положительного контроля и титруйте антитело соответствующим образом.
• Валидируйте антитело в вашей конкретной экспериментальной системе, используя положительные и отрицательные контроли (например, лизаты с нокдауном или нокаутом RUBCN).

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет производителям диагностики, лабораториям и исследовательским институтам единую точку доступа к сырью для ИВД, техническим услугам и консалтингу — охватывая каждый этап от концепции до клиники. Для исследований аутофагии и врожденного иммунитета мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные антитела, такие как это анти-Rubicon, вспомогательные реагенты оптом и поиск редких мишеней для ускорения разработки ваших тест-систем.