Кроличье поликлональное антитело против RRM1 для вестерн-блоттинга, иммунофлуоресценции/ИЦХ, иммунопреципитации, ИФА - P23921

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация RRM1

• RRM1 является большой субъединицей рибонуклеотидредуктазы (RNR) — гетеродимерного фермента, критически важного для de novo синтеза дезоксирибонуклеозиддифосфатов (dNDP) из рибонуклеозиддифосфатов (rNDP), обеспечивая мономерные предшественники, необходимые для репликации и репарации ДНК.
• Функционирует как аллостерический фермент, чья активность регулируется связыванием АТФ, а специфичность к нуклеотидному субстрату контролируется связыванием dATP, dGTP или dTTP с сайтом специфичности.
• RRM1 должен образовывать комплекс с малой субъединицей (RRM2 или p53R2) для формирования активного голофермента; большая субъединица содержит каталитические и аллостерические регуляторные сайты.
• На субклеточном уровне RRM1 локализуется преимущественно в цитоплазме, где происходит метаболизм нуклеотидов и синтез предшественников ДНК.
• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование и фосфорилирование, которые могут модулировать активность фермента, его стабильность или белок-белковые взаимодействия.
• Мутации в гене RRM1 ассоциированы с аутосомно-рецессивными синдромами деплеции митохондриальной ДНК, включая прогрессирующую наружную офтальмоплегию, что подчеркивает его ключевую роль в поддержании сбалансированного пула dNTP для синтеза митохондриальной ДНК.
• Белок принадлежит к семейству рибонуклеотидредуктаз класса I и имеет структурную гомологию с большими субъединицами бактериальных и эукариотических RNR.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Учитывая иммуноген (C-концевой регион а.о. 593-792), ожидается, что антитело будет распознавать полноразмерный белок RRM1 (~90 кДа) и может детектировать изоформы или продукты расщепления; используйте соответствующие маркеры молекулярной массы и контроли.
• Для вестерн-блоттинга оптимизируйте условия нанесения и переноса для высокомолекулярных мишеней; рассмотрите возможность использования усиленной хемилюминесценции и увеличения времени экспозиции.
• При иммунофлуоресценции/ИЦХ ожидайте цитоплазматическую локализацию; надлежащим образом фиксируйте и пермеабилизируйте клетки (например, 4% ПФА с последующей пермеабилизацией Triton X-100), чтобы обеспечить доступ антител.
• Для иммунопреципитации подтвердите совместимость с вашим лизирующим буфером и условиями элюции; используйте положительный контрольный лизат (например, HeLa или HEK293) для проверки эффективности захвата.
• Антитело проявляет реактивность с белками человека и мыши; при тестировании других видов валидируйте перекрестную реактивность из-за возможных расхождений в последовательности целевого эпитопа.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio — ваш универсальный партнер в области поставки сырья для in vitro диагностики, предлагающий широкий портфель валидированных антител, рекомбинантных белков и вспомогательных реагентов для оптимизации разработки диагностических средств от концепции до клиники. Данное кроличье поликлональное антитело против RRM1 поддерживает исследования в области метаболизма нуклеотидов, точности репликации ДНК и митохондриальных нарушений. Свяжитесь с нами для разработки антител на заказ, поставок оптом и технических консультаций, чтобы ускорить ваш проект.